抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用探究.doc

抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用探究 　 作者：马玉琛，段斐，孟明，郭晓燕，寇素茹，马幼敏 【摘要】 　　目的研究抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。方法采用弗氏完全佐剂造模，对6组采用不同药物和剂量的大鼠进行治疗观察。结果抗炎止痛口服液中小剂量组在体重、脾指数、病理检测方面与正常组无差别，同模型组有显著性差别。结论抗炎止痛口服液对AIA有良好的治疗效果。 【关键词】 抗炎止痛口服液； 诱导性关节炎； 胸腺指数； 脾指数； 关节肿 　　近年来，应用中医中药治疗类风湿关节炎的研究越来越多， 以经验方为依据，制成便于服用的剂型，也是临床上经常采用的方法。通过广泛的临床观察发现，中西医结合疗法不仅可以提高临床疗效，而且能够减轻西药的毒副反应，因而也是应用较普遍的方法。 本实验应用大鼠佐剂诱导性关节炎（adjuvant induce arthritis, AIA ）模型，研究中药抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。 　　1 器材与方法 　　1.1 动物健康SD大鼠，雄性，体重150～180 g。（购自河北医科大学实验动物中心）动物级别：SPF；动物许可证号608139。购入本实验室的动物室适应性饲料2 d，然后进行造模实验。 　　1.2 药物与试剂 　　抗炎止痛口服液，由252医院药剂科提供，批常温保存。雷公藤多苷片，100 mg/片，湖南省株州市制药厂生产，研成粉末溶于水，4℃冰箱保存。卡介苗冻干粉，卫生部北京生物制品研究所，批号2006 05。 液体石蜡，中国上海宝山县化工厂生产，批号050817。羊毛脂，北京市昌平石鹰化工厂生产，批号061127。 　　1.3 仪器与设备 　　自制的大鼠足容积测量仪［1］ 。 电子秤及电子天平。石蜡切片机，日本莱卡。 　　1.4 模型制作［2］ 　　将液体石蜡、羊毛脂按2∶1的比例混合均匀，高压灭菌后4°C保存，使用时加入卡介苗（10 mg/ml）配制成弗氏完全佐剂（CFA），充分研磨混匀乳化后，取0.1 ml注射于大鼠左后足垫皮内致敏，正常对照组注射0.1 ml生理盐水。在造模后17，39 d分别测量大鼠的体重及足跖肿胀度，39 d断头处死大鼠，收集血清，取材脾脏、胸腺、致炎侧踝关节、进行指标检测。 　　1.5 分组及给药方法 　　SD大鼠60只。随机分为正常对照组、AIA模型组、雷公藤阳性药组及抗炎止痛口服液大、中、小剂量组，每组10只。造模后18 d开始每天上午8：00～10：00灌胃给药，正常组和AA模型组给予生理盐水，每天每只大鼠2 ml；雷公藤组每天20 mg/kg；中药抗炎止痛口服液组大剂量每天60 g/kg，中剂量每天30 g/kg（相当于人临床用药量的10倍），小剂量每天15 g/kg；连续给药21 d。 　　1.6 观察项目及检测方法 　　1.6.1 AA大鼠的体重、脏器指数、足跖肿胀度的测定在致炎后17 d和39 d分别测量AA大鼠的体重和致炎侧足跖肿胀度（容积排水法）［3］，并用正常组对照，致炎39 d取脾脏和胸腺称量，计算脏器指数（计算公式：脾指数=平均脾重量/平均体重）。 　　1.6.2 足爪容积的测定 　　致炎前测量每只大鼠的后足体积，致炎后2，5，10，17，39 d测量大鼠致炎侧后足爪肿胀度（容积排水法）。 　　1.6.3 组织病理学检测于致炎第39天断头处死大鼠，立即分离后肢致炎侧病变关节，10%甲醛固定，EDTA脱钙，乙醇逐级脱水，常规包埋，切片，苏木素-伊红（HE）染色，并进行组织学评价和拍照，同时以相同±s方法取正常大鼠相同关节部位作为对照。 　　1.6.4 统计学处理 　　数据均用±s表示，采用SPSS进行统计学分析，组间比较行单因素方差分析( one-way ANOVA)，用最小显著差法( least significant difference,LSD )作两两比较，以Plt;0.05为差异有显著性。 　　　2 结果 　　2.1 各组大鼠体重变化比较 　　结果见表1。 AIA模型组大鼠从致炎后第2周起体重增长缓慢，第17天和第39天体重明显低于同期饲养的正常组大鼠（Plt;0.05），与雷公藤阳性药组接近，而抗炎止痛口服液治疗中、小剂量组大鼠体重与正常组比较，差异无显著性（Pgt;0.05），大剂量组大鼠体重减轻。表1 各组大鼠体重变化比较（略） 　　2.2 各组大鼠胸腺、脾脏指数变化比较 　　见表2。AIA模型组大鼠39 d的胸腺、脾脏指数明显高于正常组（Plt;0.05），雷公藤治疗组, 抗炎止痛口服液大剂量组大鼠的胸腺、脾脏指数明显低于AIA组大鼠(Plt;0.05)。抗炎止痛口服液中剂量治疗组大鼠的胸腺指数和脾脏指数，与正常组比较，差异无显著性（Pgt;0.05）。表2 各组大鼠致炎39 d胸腺及脾脏指数变化