新型病毒TTV感染初步探析.docVIP

新型病毒TTV感染初步探析 　　　【摘要】　目的　探讨TTV病毒在不明原因肝炎中的意义及其所致肝损害的临床特征。方法　套式聚合酶链反应检测血清TTV病毒DNA并对TTV病毒阳性病例进行临床分析。结果　病原不明肝炎中TTV病毒感染率为38.6%；均为散发病例，多见于青壮年，男女无差别；症状明显，黄疸常见，血清转氨酶中度升高；肝组织呈汇管区炎症；一般病例预后良好，但合并症易加重病情。结论　TTV病毒可以解释病原不明肝炎中的部分病因。 An inquire into the infection of a new virus(TTV) 　　【Abstract】　Objective　The aim of this study is to find out the prevalence of TTV in the cryptogenic hepatitis and the clinical features of TTV infected patients.Methods　TTV DNA in the serum was tested by nested PCR and the clinical data was analyzed.Results　Infection rate of the TTV in cryptogenic hepatitis was 38.6%. It was a sporadic disease, and involved mainly the adults, with no sexual difference. The symptoms were notable, often with jaundice, but the level of transaminase were elevated moderately. Histology revealed the portal area inflammation. If accompanied with other disease, the illness would be exacerbated.Conclusion　TTV would be accounted for part of the reason in patients with cryptogenic hepatitis. 　　【Key words】　Viral hepatitis,　　Non-A～E h epatitis　　Virus 　　已知的5种肝炎病毒已有特异性检测手段，但目前仍有慢性肝病缺乏甲～戊型肝炎病毒感染标志［1］，一些暴发性肝衰竭也无已知病毒感染标志［2］；庚型肝炎病毒(HGV)部分地解释了非甲～戊型肝炎的病因，但HGV感染更多地发生于HBV或HCV感染患者［3，4］，且对肝脏的致病性尚未完全得到证实，提示尚有甲～戊、庚型肝炎病毒以外的病毒引起急、慢性肝炎。最近，日本学者认为在输血后肝炎患者中发现的输血传播性病毒(TTV)可能是一种新的肝炎病毒［5］；国内骆抗先等［6］也在一次暴发性不明原因肝炎中发现与TTV具有同源性基因片段的病毒。为了解这种新型病毒在不明原因肝炎中的意义及其临床特征，我们对44例缺乏病毒感染标志的肝炎患者血清进行TTV DNA的巢式聚合酶链反应(PCR)检测，并对其中的阳性病例作初步分析。 　　1　材料和方法 　　1.1　研究对象　所有原因不明的急性肝炎病例均为本院1993～1998年5月的住院患者，诊断符合1995年5月北京第五次全国传染病会议修订的病毒性肝炎诊断标准，所有病例均排除5种肝炎病毒(甲～戊)现症感染的可能性(包括血清学和PCR法检查)，同时检测巨细胞病毒、EB病毒抗体及DNA(PCR法)阴性。 　　1.2　病毒DNA片段检测　采用巢式PCR检测TTV。 DNA。DNA提取：血清100 μl以蛋白酶K和十二烷基磺酸钠(SDS)裂解病毒，70℃消化1小时，苯酚、氯仿抽提。PCR反应：按文献报道［5］设计巢式引物：外引物RD037 5′-GCAGCAGCATATGGATATGT-3′，RD 　　038 5′-TGACTGTGCTAAAGCCTCTA-3′；内引物RD051 5′-CATCACCATGAATGCCAGGC-3′，RD052 5′-GTACTTCTTGCTGGTGAAAT-3′。常规加模板、dNTP和Taq酶，按下列参数进行35次PCR循环：94℃45秒，54℃45秒，72℃60秒，最后一次循环72℃420秒；取第二轮PCR产物10 μl，在2%琼脂糖凝胶电脉，出现197bp电泳带为阳性。同时设阳性及阴性对照。 　　2　结果 　　2.1　血清TTV DNA检测结果　经巢式PCR法检测，44例缺乏病毒感染标志的肝炎患者血清中