旱莲草对衰老小鼠自由基代谢影响.doc

旱莲草对衰老小鼠自由基代谢影响 　【关键词】; 旱莲草　　【摘要】　目的：; 探讨旱莲草对衰老小鼠体内氧自由基代谢的影响. 方法： 以D半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,测定脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）活性及丙二醛(MAD)含量，脑细胞膜Na+K+ATP酶、Ca2+APT酶活性. 结果： 与模型组比较,旱莲草组可明显提高脑组织SOD(Plt;0.01)和GSHPX(Plt;0.05)的活性；提高脑细胞Na+K+ATP酶(Plt;0.01)、Ca2+APT酶(Plt;0.05)活性，降低MDA含量(Plt;0.01). 结论： 旱莲草具有明显的抗衰老作用，其作用机制可能与其清除自由基的作用有关. ; 　　【关键词】　旱莲草；自由基；衰老　　0引言　　旱莲草为菊科一年生草本植物鳢肠Ecliptaprostratal的全草，江南诸省均有分布，为常用中药之一. 祖国医学认为旱莲草入肝、肾经，具有滋阴补肾、凉血止血之功效. 主治牙齿松动，须发早白，眩晕耳鸣，阴虚血热之吐血、尿血、便血、崩漏等. 旱莲草对老龄小鼠氧自由基代谢影响少见报道，我们采用D半乳糖致亚急性小鼠衰老模型，观察研究旱莲草的抗衰老作用,初步探讨其作用机制.　　1材料和方法　　1.1材料D半乳糖（上海恒信制药厂，批. 超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX），Na+K+ATP酶、丙二醛(MDA)检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）. 旱莲草购自河南省南阳市医药公司. 751型紫外分光光度计（山东高密分析仪器厂）;XHF21高速离心机（北京医用离心机厂）;XW 280A旋涡混合器（上海医科大学仪器厂）;电子分析天平（上海精密科学仪器厂）;电动玻璃匀浆机（宁波新芝生物科技股份有限公司）. 雄性昆明种小鼠50只，体质量(25±5) g，由南阳医学高等专科学校实验动物中心提供. 毕业论文 ; 　　1.2方法　　1.2.1旱莲草水煎剂的制备取旱莲草500 g加自来水2500 mL煎煮30 min,四层纱布过滤，药渣用2000 mL自来水煎煮30 min过滤，合并滤液，浓缩至1 kg/L,高压灭菌,4℃冰箱保存备用. ; 　　1.2.2动物分组及给药将50只小鼠随机分成5组，每组10只，即空白对照组，模型组，旱莲草低、中、高剂量组. 实验组分别以8 g/(kg#12539;d), 16 g/(kg#12539;d), 24 g/(kg#12539;d)旱莲草煎液灌胃给药，1次/d. 对照组、模型组每日灌胃等量生理盐水. ; 　　1.2.3造模方法模型组和旱莲草低、中、高剂量组每日颈背部皮下注射10 g/L D半乳糖0.14 g/（kg#12539;d），空白对照组注射等量生理盐水. ; 　　1.2.4小鼠脑组织匀浆制备给D半乳糖及受试药42 d 后,断头处死小鼠，迅速取出小鼠脑，用冰冷的生理盐水洗2次,滤纸拭干称质量，剪碎组织块后，倒入匀浆瓶中，量取9倍生理盐水，先取少量倒入装有组织块的匀浆瓶中，冰水中匀浆15 min，然后将余下的生理盐水加入，制成100 g/L的脑组织匀浆. ; 　　1.2.5脑组织SOD酶、GSHPX酶活力及MDA含量测定① 脑组织SOD酶活力的测定： 取上述脑组织匀浆4000 r/min离心15 min，取上清液5 μL，按试剂盒说明书方法，测定A值；② 脑组织GSHPX酶活力的测定： 取脑组织匀浆上清液，按试剂盒说明书方法，测定A值；③ 脑组织MDA含量测定：以硫化巴比妥比色法 取匀浆上清液，制备标准管、空白管、测定管，分别在532 nm处1 cm光径比色杯，蒸馏水调零，测A值. 毕业论文 ; 　　1.2.6脑组织细胞膜Na+K+ATP酶、Ca2+ATP酶活性测定取脑组织匀浆以10 625; g离心20min，按试剂盒说明书提取细胞膜测 Na+K+ATP酶活性. ; 　　统计学处理： 实验数据用x±s表示,采用方差分析处理数据. 　 　　2结果　　2.1旱莲草对D半乳糖亚急性衰老小鼠脑SOD，GSHPX，MDA含量的影响给予D半乳糖后,与对照组比较，小鼠脑中的MDA含量明显增加(Plt;0.01) ,SOD，GSHPX的活性和脑细胞膜明显下降(Plt;0.01). 同时给予旱莲草制剂组能明显降低脑中的MDA含量,提高SOD，GSHPX的活性(表1).　　表1旱莲草对D半乳糖衰老模型小鼠脑组织中SOD，GSHPX，MDA含量影响（略）　　aPlt;0.05， bPlt;0.01 vs对照； cPlt;0.05， dPlt;0.01 vs模型.　　2.2旱莲草对D半乳糖亚急性衰老小鼠脑细胞Na+K+ATP酶及Ca2+ATP酶活性的影响给予D半乳糖后,与对照组比较，小鼠脑细胞Na+