术后化疗Ⅱ期结肠癌患者血清Smad4表达及临床意义.docVIP

术后化疗Ⅱ期结肠癌患者血清Smad4表达及临床意义 　　Smads家族蛋白在将TGF-beta;信号从细胞表面受体传导至细胞核的过程中起到关键性作用，且不同的Smad介导不同的TGF-beta;家族成员的信号转导。TGF-beta;作为配体形成的受体复合物，激活Smads进入核内，共同激活或抑制它们调节的靶基因的转录。Smad是某些基因的转录激活因子，例如活性Smad(白细胞抑制因子)启动子近端的Smad-binding element(Smad结合元件，SBE)结合。当Smad4或Smad2/3被siRNA干扰时，TGF-beta;诱导LIF表达的作用下降了。Smad2或3只敲除一个，则LIF表达量仍较高。 　　摘要：目的 研究Ⅱ期结肠癌患者术后行辅助化疗前后血清Smad4表达水平及临床意义。方法 110例Ⅱ期结肠癌术后辅助化疗的患者，根据有无复发情况分为复发组(37例)和未复发组(73例);应用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)对其辅助化疗前后血清Smad4水平进行检测。分析血清Smad4水平与患者无病生存时间的关系。结果 未复发组化疗后血清Smad4水平与化疗前相比明显升高，差异有统计学意义(Plt;0.05);复发组化疗前血清Smad4显著低于未复发组，两组比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。患者血清Smad4水平与患者无病生存期呈正相关(I=-2.03，Plt;0.05)。结论 血清Smad4水平变化可作为评测Ⅱ期结肠癌患者术后辅助化疗疗效及预后的重要分子生物学指标。 　　关键词：血清Smad4 ;化疗;酶联免疫吸附剂测定法;结肠癌 　　结肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其易复发和转移的特性严重威胁着人类的健康和生命[1]。Ⅱ期结肠癌最为多见，手术治疗是其公认的治疗手段，而辅助化疗也越来越普遍，但是辅助化疗的效果却存在争议。因此，寻找能早期预测化疗疗效的分子生物学指标非常重要。Smad4基因是转化生长因子-beta;(TGF-beta;) 信号通路的重要级联分子，在信号转导、调节靶基因的转录过程中发挥着重要的作用[2]。作者之前的研究表明Smad4在结肠癌的发生发展中起着非常重要的作用，参与了肿瘤新生淋巴管的生成，促进了肿瘤的转移[3]。本研究进一步探讨血清Smad4水平变化在Ⅱ期结肠癌患者术后化疗中的临床意义。现报告如下。 　　一、资料与方法 　　1. 1 一般资料 选取沧州市中心医院 2013年5月～2015年8月经病理和临床指标诊断为Ⅱ期结肠癌患者110例，平均年龄(68plusmn;10)岁，平均随访时间为60个月。其中未复发者(未复发组)73例，复发者(复发组)37例。所有患者均行结肠癌根治术，术后行静脉化疗，化疗方案：四氢叶酸200 mg/m2，5-氟尿嘧啶425 mg/m2连续5 d，28 d为1个周期，共化疗6周期。所有患者术前均未接受化疗、放疗及免疫治疗等抗肿瘤治疗。 　　两组患者一般资料比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)，具有可比性。 　　1. 2 血清Smad4的检测方法 　　1. 2. 1 建立标准曲线 利用棋盘滴定法确定抗原、抗体最适工作浓度。采用间接ELlSA法检测不同浓度标准品的吸光度值，以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，建立标准曲线。 　　1. 2. 2 血清Smad4检测 早晨空腹抽取静脉血3 ml 25℃条件下静置1 h，10000 r/min高速离心10 min，取上清血浆1 ml，加入1.5 ml试管中，置入-65℃冰箱保存。待所有血液样品处理完之后统一采用ELISA检测Smad4蛋白浓度，实验严格按照Smad4蛋白(ELISA)试剂盒说明书操作。 　　1. 3 随访 所有患者均采用电话随访、门诊复查和住院等相结合的随访方式。 　　1. 4 统计学方法 采用Curve Expert1.30曲线软件绘制标准曲线。采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数plusmn;标准差( x-plusmn;s)表示，采用t检验;计数资料以率(%)表示，采用chi;2检验。Plt;0.05表示差异具有统计学意义。 　　二、结果 　　2. 1 两组患者化疗前血清Smad4水平变化比较 复发组化疗前血清Smad4水平为(36.5plusmn;8.7)pg/ml，而未复发组中化疗前血清Smad4水平为(75.4plusmn;12.7)pg/ml，两者相比差异有统计学意义(Plt;0.05)。见表1，图1。 　　2. 2 两组患者化疗前后血清Smad4水平变化比较 复发组术化疗后Smad4水平为(40.2plusmn;11.5)pg/ml，与化疗前Smad4水平相比差异无统计学意义(Pgt;0.05)。而未复发组化疗后Smad4水平为(99.3plusmn;21.5)p