正交法优选槐花米中芦丁提取工艺.docVIP

正交法优选槐花米中芦丁提取工艺 　【摘要】 采用微波预处理- 水提联合工艺,采用正交实验方案 ，以芦丁粗品收率为指标, 考察微波功率、微波处理时间、槐花米含水量、粒度、提取溶剂用量、提取时间等因素对芦丁的提取收率影响, 并与水提取方法进行比较。实验结果表明, 微波预处理-水提联合工艺提取效率高, 工艺简单。 【关键词】 槐花米； 芦丁； 微波预处理； 水提取； 正交试验 槐花米是一种常用中药, 属豆科植物槐Sophora japonica L. 的干燥花及花蕾, 其主要有效成分是芦丁,能调节毛细血管的渗透性, 保持和恢复血管的正常弹性。以槐米为原料提取芦丁,有多种提取工艺如水提法、酸碱法［1］、醇提法［2］等, 但是这些提取法的共同弊端就是提取周期较长, 有效成分的提取率较低。1986年Ganzler 等［3］成功地应用微波炉进行有机化合物的提取以来, 微波提取就广泛应用于样品中有机污染物、天然化合物及生物活性成分的提取等。微波辅助提取可以显著提高目标成分的提取率, 减少对提取溶剂的限制 , 达到强化与优化传热传质的目的［4］。本研究以利用微波技术改造传统工艺为出发点,考察微波预处理-水提取联合工艺的主要影响因素, 从而寻求其最佳提取工艺。 　　1 试验部分 　　1.1 材料 槐花米药材由广州致信药业有限公司中药饮片厂提供（经植物粉碎机粉碎为槐花米粉粒过筛, 制备细、中、粗3 种粒度的粉粒备用。粗粒gt;0.9 mm , 0.2 mmlt;中粒lt;0.9 mm , 细粒lt;0.2mm）；蒸馏水、芦丁标准对照品为中国药品生物制品检定所提供；其他试剂均为分析纯。 　　1.2 主要设备与仪器 格兰仕变频微波炉； 循环水真空抽滤系统；真空干燥箱。 　　1.3 实验方法 选用不同粒度的槐花米药材, 精确称量10g , 加入一定量的蒸馏水, 混合均匀。在变频微波炉中,以不同水平的微波功率、辅助时间进行微波照射。每份样品待其冷却后, 重复照射一次。微波预处理后, 以不同水平的提取溶剂用量与提取时间进行煎煮提取（提取过程中保持溶剂恒定）。将提取液趁热抽滤，滤液静置过夜。析出淡黄色沉淀，抽滤，沉淀物用水洗3次，抽干，60℃真空干燥，得芦丁粗品，计算粗品收率。 　　1.4 定性分析 取芦丁粗品适量以少量乙醇溶解后点于同一聚酰胺薄层板上, 点的位置要高于展开剂, 以甲醇- 丙酮- 苯- (8∶2∶2) 为展开剂, 展开后取出, 晾干，以1%三氯化铝甲醇溶液喷雾显色，显色前后分别于紫外灯(波长为254 nm) 下检测, 与芦丁标准品对照, 确认提取物中含有芦丁。 　　　2 结果 　　2.1 正交实验方案 水分是最易极化的物质, 对微波呈强烈选择性吸收。一定条件下, 微波场对生物组织的影响表现为功率窗的效应, 微波辐照时间体现了微波能量的积累。水提取影响因素很多, 其中最主要的3个因素是粒度、提取溶剂用量和提取时间。因此根据实验与分析, 结合微波提取因素和水提取因素, 选用正交表L18 (37) , 研究微波预处理-水提取联合工艺主要因素：微波功率、微波时间、药材含水量（质量为10 g 的药材, 微波辐照时加入的含水量）、粒度、提取溶剂用量、提取时间对槐花米中芦丁提取特性的影响, 并进行了优选条件的验证和各因素的显著性分析。选定实验因素与水平见表1 。表1 槐花米微波辅助提取因素及水平表（略） 　　2.2 正交实验直观分析 以芦丁粗品为指标, 正交实验直观分析结果见表2 、表3。由表2 、表3可见, 以芦丁粗品为指标成分进行分析时, 各因素对实验结果的重要性为：Fgt;Agt;Dgt;Cgt;Egt;B , 优选条件组合是A3B1C1D2E2F3 , 即： 微波功率560 W , 辐照时间2 min ×2 次, 基质含水量40 mL,粒度为中粒, 提取溶剂用量120 mL , 提取时间2.5 h 。从方差分析表可以看出，所考察的因素对芦丁收率均无统计学意义（Pgt;0.05），但从表3可以看出，这些因素对于芦丁的收率有一定的影响。综上所述，优选条件组合是A3B1C1D2E2F3。表2 L18 (37) 槐花米微波辅助提取正交实验结果（略）表3 芦丁粗品的直观分析（略）表4 芦丁粗品的方差分析（略） 　　2.4 优选条件的验证 以芦丁粗品为指标, 优选条件组合是A3B1C1D2E2F3, 即： 微波功率560 W(80 %功率档) ,辐照时间2 min ×2 次,基质含水量20 mL, 粒度为中粒, 提取溶剂用量120 mL , 提取时间2.5 h , 重复实验3 次,芦丁粗品平均收率22.54%。 单纯用水提取方法，即粒度为中粒, 提取溶剂用量120 mL , 提取时间2.5 h , 重复实验3 次,得到的芦丁粗品平均收率14.