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沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织MDA及GSH含量影响及其抗疲劳效果探究
沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织MDA及GSH含量影响及其抗疲劳效果探究
作者:陈轶玉,乔慧,陆培培,黄成【摘要】; 采用昆明小鼠为实验对象,通过饲喂不同比例的沙棘粉饲料4周以后,在抗疲劳实验中,以血清乳酸脱氢酶(LDH)活力、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4个生理参数为指标观察沙棘粉的抗疲劳效应,结果表明,饲喂4周沙棘粉剂的小鼠,其LDH、LG含量均显著高于对照组;其抗疲劳时间亦显著增长,且抗疲劳实验30min和60min后的血乳酸水平均低于对照组。在检测小鼠脑组织的MDA和GSH含量时发现4%~6%剂量沙棘粉能降低MDA含量,提高GSH含量,表明沙棘粉能拮抗D-半乳糖的损伤,达到维生素相同效果。
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; 【关键词】; 沙棘粉;衰老小鼠;脑组织氧化还原物质;抗疲劳效果
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; 沙棘制品不仅可以作为饵料中的维生素源,还可制成供人类食用的产品。沙棘果享有“维生素仓库”和“神秘果”之称,沙棘果中含有丰富的生物活性物质,具有祛痰、利肺、养胃、健脾等功效,对心血管系统、免疫系统、抗肿瘤、抗衰老、抗炎、抗辐射损伤等方面均有显著的药理效应[1]。可以预见,沙棘制品的市场前景十分可观,而我国沙棘资源浪费严重。因此开发利用此资源已迫在眉睫。西部地区政府及种植户迫切希望高等学校、科研院所开展沙棘资源开发利用的,本实验采用沙棘果的干粉作为实验材料,通过饲喂昆明鼠4周以后,进行其抗疲劳效果的研究,为沙棘资源开发利用提供基础性实验参数。 毕业论文
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; 1; 材料与
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; 1.1; 动物来源及实验场所; 实验动物选自南京安立默实验动物繁殖调剂中心(许可证号SYXK 2002-0059), 在分组前选用了出生日龄(4周龄)及体重都基本相同的昆明小鼠(雄性);实验场所为南京大学药业有限公司动物房(许可证号SCXK2002-0016)。
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; 1.2; 实验分组; 取小白鼠147只,随机分成7个大组,每组均为21只,组1作为饲喂添加复合维生素的对照组,组2作为饲喂无复合维生素饲料的空白对照组,组3~组7作为饲喂添加比例不同的沙棘粉饲料实验组,小鼠均单笼饲养4周。
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; 1.3; 饲喂剂量及配方; 每日投喂足量饲料和水,各组饲料配方如表1。
表1; 各组配方成分表; (%); ; 1.4; LDH活力、BLA、MG、LG含量测试; 抗疲劳实验前,从每组取小鼠3只,眼眶放血制血清送检,测试乳酸脱氢酶(LDH)活力、肌糖原(MG)和肝糖原(LG),LDH活力,参数King氏法测定[2]。 毕业论文
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; 1.5; 抗疲劳实验; 抗疲劳试验依陈奇方法[3],将饲喂4周的小组分别取12只按小鼠体重10%负重砝码,于水温25~27℃、40cm深、直径为20cm的标本瓶中游泳,进行抗疲劳试验。待其头部没入水下5秒时迅速捞起,记录游泳时间,待其恢复30min后各取6只眼眶放血,制备血清,待送检测试BLA,各组剩余6只待其恢复60min后再眼眶放血,制血浆送检测试BLA。
; 考虑到在对每一只鼠的每一次取血操作时,对动物造成不同程度伤害性刺激,由此引起的抗疲劳强度无法保持一致,故而设计成每一个实验测定都分批取样,进行一次性采血。
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; 1.6; 小鼠脑组织MDA、GSH含量; 取饲喂4周的小鼠,每组6只,断颈处死,迅速取出大脑,用冰冷的PBS缓冲液制备10%脑匀浆,离心后取上清液进行MDA和GSH含量测定。测定步骤按试剂盒说明书进行,MDA、GSH测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
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; 2; 结果
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; 2.1; 饲喂4周后各组小鼠LDH活力、MG、LG与BLA值; 见表2。饲喂4周后各组小鼠血液指标初始值,各组取6只小鼠眼眶测试MG、LG、BLA和LDH,因这批动物取自抗疲劳动物之前,故称为初始数值,表2为测试结果。表2; 各组小鼠LDH活力、MG、LG与BLA初始值; (x±s) 毕业论文
注:表中不同组的相同指标中,*表示差异有显著性;**表示差异有非常显著性 ; 由表2统计结果可知,g3~g5沙棘粉组的小白鼠,其MG和LG含量均显著大于空白组(Plt;0.01),其中维生素组也显著大于空白组(Plt;0.01);BLA含量各组差异无显著性;g4~g5沙棘粉组和维生素组的LDH活力均显著大于空白组(Plt;0.01),说明4%~6%沙棘粉在提高小鼠的LDH活力方面达到维生素对照组效果。g6~g7组变化不显著,说明8%~10%沙棘粉的效果不明显。
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; 2.2; 抗疲劳及血乳酸指标; 各组随机取12只鼠,做抗疲劳实验,于其休息30min、60min两个阶段各取6只放血制血清测试BLA含量,各组的实验数据进行均数差显著性检验,统计结果见表3。
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