基于连续发酵驯化的高耐盐性酿酒酵母的育种-应用与环境生物学报.pdfVIP

2014-06-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.11032 / Chin J Appl Environ Biol 2014 20 ( 3 ) : 363-370 应用与环境生物学报 ， 基于连续发酵驯化的高耐盐性酿酒酵母的育种* ** 周 利 汤岳琴 孙照勇 木田建次 四川大学建筑与环境学院 成都 610065 摘 要 耐盐酿酒酵母菌株的育种对降低燃料乙醇生产成本具有重要意义 . 以具有优秀乙醇发酵能力的工业酿酒母 菌株KF-7为出发菌株，通过连续发酵、产孢子及孢子培育、交配等获取稳定耐盐菌株 . 在盐胁迫条件下利用连续乙 醇发酵驯化获得了耐盐突变菌株KF-7(4). 在此基础上，通过孢子分离、培养、评价和交配，获得两株耐盐二倍体菌 KF-7(4)-3 KF-7-D1. 3 50 . 9% KCl 3 株 与 这 株耐盐菌株在 次转接过程中保持着稳定的耐盐性 并且在 浓度下， 株耐盐菌 株的乙醇发酵能力显著优于出发菌株 KF-7 ：在15% YPD培养基中，发酵 36 h 时的乙醇浓度比出发菌株KF-7 提高了 21%. 有盐和无盐条件下发酵过程中胞内海藻糖含量分析表明，突变菌株 KF-7(4) 和菌株KF-7(4)-3 即使在无盐条件 下的海藻糖积累能力明显高于出发菌株KF-7. 本研究获得的变异酿酒酵母菌株具有较高的耐盐性和稳定性，耐盐性 与胞内海藻糖积累能力提高相关 . 因此，基于连续发酵的进化工程手段可以有效地用于培育具有某种稳定性状的酿 酒酵母菌株 . 图5 表 1 参22 关键词 酿酒酵母；耐盐性；乙醇连续发酵；四孢子分析；燃料乙醇；海藻糖 CLC TQ920.1 Breeding of high salt-tolerant Saccharomyces cerevisiae strains based on * continuous ethanol fermentation ZHOU Li, TANG Yueqin**, SUN Zhaoyong KIDA Kenji Architecture and Environment College, Sichuan University, Chengdu 610065, China Abstract Waste biomass resources such as molasses and kitchen waste are important raw materials for the production of fuel ethanol. Breeding of salt-tolerant Saccharomyces cerevisiae strain is of great importance for reducing the production cost of fuel ethanol from these wastes with high salt content. Strain KF-7, an industrial strain with excellent ethanol fermentation ability, was used as original strain in this st