涎腺粘液表皮样癌中P15及TGF β1表达及意义.docVIP

涎腺粘液表皮样癌中P15及TGF β1表达及意义 　 作者：韩亮 朱润庆 马华玲 刘卫容 肖兰 【摘要】 　　目的：研究P15及TGF β1在粘液表皮样癌中的表达，探讨它们在粘液表皮样癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测48例粘液表皮样癌及10例正常涎腺组织中P15及TGF β1蛋白的表达。结果：粘液表皮样癌中P15的阳性表达率为72.69%(35/48)，显著低于正常涎腺组织中的表达(Plt;0.05)。P15在高、中、低分化粘液表皮样癌中的阳性表达率分别为90.9%(20/22)、73.7%(14/19)、16.7%(1/6)，与组织分化程度存在显著相关性(P=0.0026)。P15在粘液表皮样癌中的阳性率与淋巴结转移有显著性相关性(Plt;0.05)，TGF β1在粘液表皮样癌及正常涎腺组织中的阳性高表达率之间存在显著差异(P=0.001)。P15和TGF β1在粘液表皮样癌的表达呈显著性相关性(Plt;0.05)。结论：P15的表达与粘液表皮样癌的发生和发展关系密切，检测该指标有助于判断粘液表皮样癌的病理分级和预测淋巴结转移。TGF β1的高表达可能与粘液表皮样癌的恶性生物学行为有关。 【关键词】 粘液表皮样癌　P15；TGF β1　免疫组织化学 　　肿瘤的发生是一个多因素多步骤的慢性病理过程。细胞周期是细胞的一种正常生活活动过程。近年来，细胞周期与细胞癌变的关系被越来越多的学者所关注。细胞进入分裂周期需通过两个“限制点”：一是G1→S期转换之时，另一个是G2→M期过渡之际。而细胞增殖的关键是G1期的启动，因此对细胞的研究多集中在G1→S期，即细胞在静止状态下是如何进入DNA合成期的。G1期的启动除受周期素(Cyclin)和周期素依赖性激酶(Cyclindependentknases,CDK)的正向控制外，还受到一些细胞周期调控相关基因的制约。如果这种负向调控作用丧失，细胞就会生长失控、转化，导致肿瘤的发生［1］。粘液表皮样癌是较常见的涎腺恶性肿瘤，约占30%［2］，关于其组织来源和分类上仍无一致意见，尚有许多争论。其组织结构复杂，分化程度不一，病理形态与生物学行为有时不一致，因此在临床病理诊断及预后判断上存在一定难度。 P15是定位于9P21的抑癌基因，其产物能竞争性结合CDK，从而抑制Rb蛋白磷酸化，导致细胞生长抑制。已有研究表明P15基因的缺失或突变与很多肿瘤的发生、发展相关［3］。转化生长因子β(transforming growth factor beta, TGF β)是一种功能复杂的多肽生长因子，它参与细胞内信号传导过程，防止细胞由G1期进入S期，抑制细胞增殖［4，5］。然而由于转化生长因子β受体的缺失、突变或低表达，使自分泌或旁分泌产生的TGF β不能被激活［6］。高水平TGF β聚集在肿瘤组织中，会促进某些细胞外间质细胞的增生，引起结缔组织粘连，血管增生及对机体的免疫功能抑制，从而导致肿瘤的发生和发展。TGF β1是TGF β家族中研究最多的一种多肽。目前发现在不同组织类型的人类肿瘤中，TGF β1的表达存在差异，而TGF β1在粘液表皮样癌中的表达国内报道不多。本研究应用免疫组织化学法，对不同分化程度的粘液表皮样癌组织中P15、TGF β1的表达进行观察，探讨它们在粘液表皮样癌发生发展过程中的作用及相互关系，可能对粘液表皮样癌的病理分级、预后判断和临床治疗有一定的实用价值。 　　2 材料与方法 　　2.1 标本来源 收集本院病理科及市三医院病理科手术切除粘液表皮样癌标本共计48例，其中男30例，女18例。年龄13～68岁，平均38.3岁。肿瘤发生的部位：腮腺22例，颌下腺4例，舌下腺2例，腭部11例，舌部3例，颊部2例，磨牙后区2例，牙龈部及口底各1例。组织学分型：高分化粘液表皮样癌22例、中分化粘液表皮样癌19例，低分化粘液表皮样癌7例。有淋巴结转移的7例，无淋巴结转移的41例。肿瘤直径≥5cm的11例，lt;5cm的37例。另选取10例正常涎腺组织作对照。所有标本均经10%福尔马林固定、石蜡包埋、4μg连续切片，分别作HE及免疫组织(SP法)染色。所有患者术前均未作任何治疗，HE及免疫组化染色结果均经两位有经验的病理科医师双盲目法阅片且取得一致结果。粘液表皮样癌的诊断及病理分级依据《口腔组织病理学》第4版确定。 　　2.2 主要试剂 鼠抗人P15单克隆抗体、兔抗人转化生长因子β1多克隆抗体、即用型免疫组织化学超敏SP试剂盒(广谱)、DAB染色剂等均购自福州迈新生物技术开发公司。 　　2.3 实验方法 按迈新公司提供的染色程序进行SP免疫组织化学染色。用已知的P15及TGF β1阳性片作为阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。 　　2.4 结果判