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液基薄片技术在胸腹水诊断中应用 　 作者：韩旭东 柳杨 王西霞 陈晓艳 【摘要】 　　目的：研究液基薄片技术应用于胸腹水细胞学诊断的价值。方法：同一标本应用传统制片（CP）和液基薄片技术制作涂片，常规染色，并在显微镜下做比较。结果：诊断结果薄片阳性率、阴性率均高于传统制片，可疑、不满意涂片均低于传统制片，但只有不满意标本薄片与CP存在显著性差异；CP和薄片形态特征对比，薄片各方面质量均好于CP，且阅片时间明显缩短。结论：薄片和CP在检出率没有明显的区别，应用薄片技术制片质量提高，利于提高诊断的准确性。应用薄片技术阅片时间减少，提高工作效率，减轻了劳动强度，且可以重复制片，作特殊染色及免疫细胞化学等工作。其特点：成本较高，制片劳动强度稍大，时间较长。 【关键词】 液基薄片技术 细胞学诊断 恶性肿瘤 　　胸腹水是许多癌症患者的常见并发症，其细胞学检查对疾病的诊断有重要的意义。多年来，查找癌细胞主要应用传统制片方法，该方法存在着一些不利因素可能影响诊断，如背景不清晰、大量红细胞、炎性、渗出物及粘液，细胞涂片厚、面积过大、敏感性低等[1]。薄层细胞检测（Thin-layer cytology test）即液基薄片技术，是20世纪90年代发展起来的一项制片新技术，最初用于妇科宫颈细胞学，与传统涂片（CP）诊断相比，制出的玻片细胞结核清晰，背景明朗，不仅具有高度一致性，而且提高了上皮内病变的检出率[2～5]，其成果是显著的。但这项技术在非妇科方面（包括胸腹水细胞学诊断）的应用，在国内报道较少。我们在本院胸腹水细胞学诊断应用液基薄片技术，并与CP做一比较，探讨其应用价值。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　我院病理科2006年11月至2007年4月收集的胸腹水标本141份，每份均制备传统和薄片两种涂片，其中包括胸水78份，腹水63份。 　　1.2 方法 　　每份标本取液体40ml，平均分成2份离15min，2400r/min，弃去上清液。其中1份用来做CP两张，将另1份应用LPT方法制备薄片。LPT方法制片方法如下：分别加入3～4ml保存液，振荡器混匀倒入15ml离心管，振荡器充分混匀，离15min，2400r/min，弃去上清液，倒置试管吸干水分，加入细胞团2倍的细胞基液（如无细胞团加基液50μl），振荡器充分混匀，取50μl涂片、烘干，每例制薄片1张，必要时可重复。 　　两种涂片均在95%乙醇固定15min后HE染色，显微镜下观察，细胞分恶性组、可疑肿瘤组和良性组，恶性组包括腺癌细胞、鳞腺癌细胞、癌细胞及各种肿瘤细胞；可疑肿瘤组包括可疑癌细胞、又非典型的细胞。良性组包括不典型细胞、间皮细胞以及鳞状细胞。另有1组不满意标本即仅见红细胞或未见细胞。 　　1.3 统计学处理 　　采用SPSS 10.0统计软件进行统计学分析，组间差异采用卡方检验，以P＜0.05为有显著性差异，P＜0.01为高度显著性差异。 　　2 结果 　　2.1 CP和薄片诊断结果比较 　　2.1.1 在CP诊断结果中，恶性组31例（22.0%），可疑肿瘤组21例（14.9%），良性组80例（56.7%），不满意标本9例（6.4%）。 　　2.1.2 在薄片诊断结果中，恶性组39例（27.7%），可疑肿瘤组15例（10.6%），良性组86例（61.0%），不满意标本1例（0.7%）。 　　2.1.3 恶性组中薄片比CP多8例，可疑肿瘤组中薄片比CP少6例，良性组中薄片比CP多6例，不满意标本薄片比CP少8例。经统计学处理，不满意标本薄片与CP存在显著性差异，其余结果无显著性差异。 　　2.2 CP和薄片形态特征对比 　　2.2.1 薄层涂片背景中红细胞、炎细胞和细胞碎片较少，细胞分布均匀，重叠现象较少，细胞形态保存完好，且片段也保存完好，不满意标本涂片数量少。在细胞形态上，与CP涂片相比：细胞小且无退变现象。良性细胞呈一致性，细胞核呈圆形、椭圆形，核膜清晰且光滑，染色质匀细，着色浅，可见细小的核仁。恶性细胞，细胞大小不一，核质比增大，细胞核形态多样，其核膜凹凸不平，核膜厚，染色质粗，集结呈粗粒状团块状，并见明显的核仁。细胞质在两种涂片未见明显区别。 　　2.2.2 两者均应用HE染色，液基薄片比CP涂片易着色。 　　2.2.3 阅片时间上，因为CP每例均涂两张涂片，1例阴性涂片阅完约需4～5min，1例阳性涂片阅完约需5～7min。液基薄片因为细胞被集中在2cm大小的范围内，1例阴性涂片约需1～2min，1例阳性涂片约需3～5min。 　　3 讨论 　　薄层细胞检测是90年代发展起来的一项制片新技术，已成功地应用于妇科细胞学，在非妇科方面的应用国内报道较少。我们在应用这一技术于本院胸腹水细胞学诊断，并与CP做了比较。 　　在检出率方面恶性组中薄片比CP高5.7%，