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热性中药高良姜对大鼠能量代谢影响
热性中药高良姜对大鼠能量代谢影响
作者:漆晓琼 黄丽萍 蒙晓芳
【摘要】 目的观察热性中药高良姜对大鼠能量代谢的影响。方法给正常大鼠灌服6.0和3.0 g·kg-1高良姜水煎液,连续给药43 d,测定给药期前及给药后每5 d老鼠体质量,检测能量代谢相关酶活性及脂肪代谢的影响,同时采用放免法检测血清中的T3,T4,TSH含量。结果高良姜能增加大鼠体质量,增加大鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH活性,增加血清游离脂肪酸含量、脂蛋白脂酶、肝脂酶活性,同时升高血清T3,T4,TSH含量。结论热性中药高良姜能促进大鼠能量代谢,其促进能量代谢的机制与升高血清甲状腺素水平有关。
【关键词】 能量代谢; 高良姜; 药性
生物能量是维持机体生命的重要物质基础,能量代谢是人体物质代谢的最基本形式。中医的寒热证型与机体能量代谢的关系密不可分,寒热中药可能通过影响能量代谢的某些环节,实现对寒热证的调节[1]。本实验拟通过对典型热性中药高良姜对机体能量代谢的影响,探索热性中药的作用规律和药性特征,进一步为药性的科学评价打好基础,从而更好地指导中药的临床运用。
1 材料与仪器
1.1 受试药物高良姜,购自北京市鹤元堂医药科技有限公司,产地广东。
1.2 试剂SD 大鼠36只,雄性,体质量160 ~ 180 g,均由上海斯莱克实验动物技术有限公司提供,许可证编号为SCXK(京)2002-0003。
1.3 试剂 ATP酶测试盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒、游离脂肪酸测试盒、总脂酶试剂盒,均购自南京建成生物工程研究所;T3放射免疫分析测试盒、T4放射免疫分析测试盒均购自北京科美东雅生物技术有限公司。
1.4 仪器实验 UV-2000 型紫外可见分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司)、Labfuge 400R,台式低温离心机(德国Heraeus 公司产品)、电热恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂),GC-911γ放射免疫计数器(中国科大中佳光电)。
2 方法
2.1 药物制备取定量的高良姜置入砂锅中,加入8 倍蒸馏水浸泡60 min,快速加热至沸腾,而后保持微沸状态30min,趁热过滤;剩余药渣中加入6 倍蒸馏水,快速加热至沸腾,而后保持微沸20 min,趁热过滤。合并两次滤液,水浴浓缩至含生药量0.6 g 生药/ ml, 4℃储存备用。
2.2 动物分组及给药随机分为3组,即为空白对照组、高良姜低剂量组和高剂量组。空白对照组给予等容量蒸馏水;高良姜高剂量组给予高良姜水煎液6.0 g生药/kg,高良姜低剂量组给予高良姜水煎液3.0 g生药/kg,每日上、下午各1次。
2.3 检测方法从分组当天起每5日称量大鼠体重并记录,第44天将大鼠称重,麻醉后由心脏取血,2 000 r/min离心10 min,分离血清,取出肝脏备用。
2.3.1 大鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH活性的测定准确称量一定量肝脏组织,按重量体积比加9 倍生理盐水,制成10%的匀浆,1 500 r/min离心10 min,取上清液按试剂盒法进行肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SDH活性的测定,组织蛋白的测定采用考马斯亮蓝法。
2.3.2 血清游离脂肪酸(NEFA)、脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)的测定取血清200 μl按试剂盒说明书进行NEFA的测定,取50 μl按试剂盒说明书进行LPL及HL的测定。
2.3.3 血清T3、T4、TSH的测定取血清0.5 ml,放免法进行T3,T4,TSH含量测定。
2.4 统计学方法采用SPSS15.0进行统计分析。资料经过方差齐性检验,数据用±s表示。组间差异比较用t检验。
3 结果
3.1 高良姜对大鼠体质量变化量的影响结果见表1。与空白对照组比较, 高良姜高、低剂量均可使动物体重明显增加。表1 高良姜对大鼠体质量变化量的影响(略)
3.2 高良姜对大鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH活性的影响结果见表2。与空白组比较,高良姜高、低剂量组均可明显升高大鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SDH活性除低剂量组对Na+-K+-ATP酶的升高无显著统计学意义,其他均有极显著统计学意义(Plt;0.05,Plt;0.01)。表2 高良姜对大鼠肝脏Na+-K+-Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和SDH活性测定(略)
3.3 高良姜对大鼠血清NEFA,LPL,HP的影响结果见表3。与空白对照组比较,高良姜高、低剂量组均可升高大鼠血清NEFA含量和LPL、HP活性,但无统计学意义(Pgt;0.05)。表3 高良姜对大鼠血清NEFA,L
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