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羊肚菌多糖提取分离条件探究
羊肚菌多糖提取分离条件探究
【摘要】 目的 研究羊肚菌多糖提取的最佳方法,并比较不同种羊肚菌在多糖得率上的区别。方法 以羊肚菌GIM5.69[(Morchella esculenta(L.)Pers.)]及黑脉羊肚菌GIM5.29(Morchella elata)的菌丝体作为实验对象,研究与常规热水浸提方法相比,超声及酶处理对多糖得率的不同影响,并比较两类羊肚菌在多糖得率上的区别。结果 超声和酶法均可显著提高多糖得率,其中以超声10 min提高效果最明显。不同类型的菌种在多糖产量上存在明显差异,GIM5.69型菌种多糖得率明显高于GIM5.29型。结论 羊肚菌多糖最佳提取分离条件为:超声10 min,超声频率为40 kHz,在90 ℃下恒温加热150 min,浸提2次。
【关键词】 羊肚菌;黑脉羊肚菌;多糖;提取工艺
Abstract:Objective To optimize the extraction technology of Morchella polysaccharide. Methods With GIM5.69 (Morchella esculenta (L.) Pers.) and GIM5.29 (Morchella elata) as the research object, the difference of polysaccharide yield with lixiviation in polysaccharide extraction between ultrasound and enzyme was observed. At the same time, the difference of polysaccharides yield of these two Morchella was compared. Result Ultrasound and enzyme both can improve the polysaccharides yield, and the effect of 10 min of ultrasound was the best. The polysaccharides yield of GIM5.69 was higher than that of GIM5.29, which means different strain has different polysaccharides yield. Conclusion The best extraction condition is 10 min of ultrasound at the frequency of 40 kHz, heating 150 min at 90 ℃ and lixiviation twice.
Key words:Morchella esculenta;Morchella elata;polysaccharides;extraction technology
羊肚菌又名羊肚菜、美味羊肚菌,隶属于子囊菌亚门(Ascomycotina)盘菌纲(Discomycetes)盘菌目(Pezizales)羊肚菌科(Morchellaceae)羊肚菌属(Morchella),共有28种,在我国陕西、甘肃、青海等20多个省市都有着极为广泛的分布[1],且在世界多个国家有分布。羊肚菌多糖是羊肚菌主要的活性成分之一,具有抗肿瘤、抗菌、抗疲劳、增强免疫力等多种药理活性。有研究表明,羊肚菌多糖对小鼠肝脏损伤有明显的保护作用[2]。由此,提高羊肚菌多糖的提取率也是将其应用于工业生产的关键步骤。常规的羊肚菌多糖提取方法以热水浸提为主,贾氏等[3]研究发现,羊肚菌菌丝体多糖最佳的提取条件为:浸提温度90 ℃,浸提时间150 min,浸提次数2次,加水比1∶40。鉴于单纯热水浸提多糖的提取量有限,笔者在前人研究基础上进行了改进,研究超声及其酶法对多糖得率的影响,为工业生产提供必要的研究基础。
1 材料与方法
1.1 试药与仪器
供试菌种羊肚菌GIM5.69[(Morchella esculenta (L.) Pers.)]及黑脉羊肚菌GIM5.29(Morchella elata),广东省微生物研究所微生物菌种保藏中心提供。纤维素酶和果胶酶由Solarbio公司提供,标准葡聚糖Dextran T70为Pharmacia 公司产品,其余试剂均为国产分析纯。Labofuge 400R台式冷冻离心机(德国Heraeus),恒温培养箱(上海智城),RE-52旋转蒸发仪(上海青浦沪西),BP211D电子天平(德国Sartorius),MLS- 3750灭菌器(日本Sanyo)。
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