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结肠癌患者手术前后血清miR—21变化 　结肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一， 近年来由于我国生活水平的提高， 高蛋白低纤维饮食增加， 体力劳动减少， 导致结肠癌发病率逐年上升。2012年统计数据显示， 结肠癌死亡率在西方国家居第二位， 在中国仅次于肺癌、胃癌、肝癌和食管癌， 居第五位[1， 2]， 且发病率以每年4.2%速度增长[3]。近年来随着研究的深入， 认识到microRNAs （miRNAs）是一类长度约 18～25 nt 的非编码小RNAs， 主要调节细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理过程， 且血清miR-21的表达与多项恶性肿瘤密切相关[4]， 尤其是在结肠癌的诊断及预后方面的敏感性和特异性均高于常用的结肠癌筛查手段和血清分子标记物[5]。本研究通过检测结肠癌患者术前、术后血清miR-21， 并与正常人血清miR-21表达水平对比， 探讨其对结肠癌患者预后的意义， 报告如下。　　1 资料与方法　　1. 1 一般资料 选取2015年1～12月收治已确诊为结肠癌的患者80例作为结肠癌组， 其中男51例， 女29例， 年龄39～75岁， 平均年龄（52.3plusmn;11.4）岁。同时选取30例健康体检志愿者作为对照组， 男23例， 女17例， 年龄37～73岁， 平均年龄（49.7plusmn;10.2）岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较， 差异无统计学意义（Pgt;0.05）， 具有可比性。入选本研究， 均符合伦理委员会基本要求， 研究对象均可主动配合完成调查， 并取得研究对象知情同意。　　1. 2 纳入及排除标准　　1. 2. 1 纳入标准 ①经影像及血液检查诊断为可手术结肠癌；②接受结肠癌根治术， 经术后病理确诊为结肠癌；③术前未接受过任何放、化疗等辅助治疗；④术后预计生存期gt;3个月；⑥能够自愿配合完成本研究并签署书面知情同意患者。　　1. 2. 2 排除标准 ①不能经影像学确诊的病灶；②复发或转移的结肠癌患者；③有其他肿瘤病史及免疫性大肠疾病、家族性腺瘤息肉、遗传性非腺瘤性结肠癌患者以及术前行化疗或放疗等辅助治疗的患者；④有心、肝、脑、肾及合并严重术后并发症如严重感染等。　　1. 3 检测方法 分别在结肠癌患者行根治性手术前和术后3周采集全血；体检健康者于肠镜检查后1周内采集全血。均采集空腹肘静脉血2～3 ml于真空无抗凝剂管， 置于温室下1500 r/min离心5 min去除血细胞， 收集血清置于4℃条件下， 12000 r/min离心血清5 min， 进一步去除残留的血细胞后置于-80℃冰箱。Trizol法提取总RNA， Takara cDNA合成试剂盒合成cDNA， 使用广州锐博生物公司miR-21和U6引物， SYBR green法荧光定量PCR检测miRNA-21相对表达水平。记录荧光信号到达反应前所设定的值时， 每个反应管中所经历的循环数， 即Ct值， 采用定量聚合酶链反应（PCR）中的相对定量法， 计算公式：△△Ct=（CtmiR-21-CtU6）肿瘤-（CtmiR-21-CtU6）对照。F=2-△△Ct表示肿瘤组织miR-21表达量相对于正常组织表达量变化的倍数。　　1. 4 统计学方法 采用SPSS15.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数plusmn;标准差（ x-plusmn;s）表示， 采用t检验；计数资料采用chi;2检验。Plt;0.05表示差异具有统计学意义。　　2 结果　　术前结肠癌组血清miR-21相对表达量为（25.123plusmn; 29.822）， 明显高于术后结肠癌组的（0.901plusmn;1.232）和对照组的（1.102plusmn;0.735）， 差异均具有统计学意义（Plt;0.05）。见表1。　　3 讨论　　结直肠癌是最常见的肿瘤之一， 其发病率占所有肿瘤的10%～20%， 其发病率逐年上升， 其疾病负担十分巨大[6]。由于缺乏特异性强的早期诊断手段， 侵入性操作技术和病理分析是目前唯一可依赖的确诊手段， 导致该病确诊时大多已处晚期， 错过根治的最佳机会。有报道显示， 肠癌Ⅰ期患者和Ⅳ期患者 5年生存率分别90%和6%[7]， 但大部分患者在诊断时已经属中晚期， 因此寻找一种敏感性和特异性强的非侵入性筛查工具， 早期确诊是降低结肠癌死亡率的有效手段。血清miRNA与肿瘤组织miRNA的相关性也已经得到印证[8]。若能明确血清miRNAs与结肠癌及其预后之间的联系， 将大大提高结肠癌早期诊断率， 早期更换经miRNA筛选得出的预后差的患者的治疗策略， 降低其死亡率。　　miRNA即microRNA自1933年被发现以来， 一直是肿瘤领域研究的热点。有研究表明， miR-21在结肠癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、宫颈癌等肿瘤血清中表达