膀胱癌组织中MMP2及TIMP2表达及相关性探究.doc

膀胱癌组织中MMP2及TIMP2表达及相关性探究 　 作者：柳学春 余菊玲 高平 董长垣 【摘要】 　　目的: 研究 基质金属蛋白酶2（MMP2）和金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与膀胱癌侵袭、转移的关系。 方法 : 应用 链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶(SP)免疫组化方法, 检测5例正常膀胱组织和35例膀胱移行细胞癌组织中MM P2 和TIMP2的表达。结果:MMP2、TIMP2在膀胱正常组织中均呈阴性表达，而在35例膀胱癌组织中均不同程度的表达，阳性率分别为45.71%和51.43%。MMP2随肿瘤病理分级和临床分期的增高而增高（Plt;0.05）,TIMP2的表达变化与肿瘤病理分级和临床分期的无相关性(Pgt;0. 05)。结论:MMP2和TIMP2相互作用对于膀胱癌的侵袭 发展 发挥了重要作用；MMP2 可能对判断膀胱癌的预后有帮助。 【关键词】 膀胱移行性细胞癌； 基质金属蛋白酶2； 金属蛋白酶组织抑制因子2； 肿瘤侵袭 　　膀胱肿瘤是一类多中心、易复发及浸润性生长的肿瘤疾病, 早期发现具有浸润性倾向的浅表性肿瘤和可能发生转移的浸润性肿瘤, 对于选择合适的 治疗 方法和判断预后具有重要意义。然而, 目前 还没有合适的生物学标记物可以准确预测膀胱癌的预后, 因此大多数研究都在试图发现一些较特异的肿瘤标记物。本研究采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶(StreptavidinPeroxidase, SP )免疫组化方法对基质金属蛋白酶2（MatrixmetalloprotEinase2, MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（tissue inhibitor of metalloprotEInase2,TIMP2）在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与膀胱癌侵袭、转移的关系进行探讨。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　本组35例膀胱移行细胞癌石蜡标本来自武汉市第五 医院 2003年7月至2006年12月期间的部分手术切除标本。其中男21例, 年龄25～68 岁；女14例,年龄33～ 69岁。所有病理标本均经病理诊断为膀胱移行细胞癌。肿瘤病理分级根据世界卫生组织(WHO)分类标准, 临床分期根据国际抗癌联盟标准进行TNM分期。另取5 例前列腺增生症手术患者的膀胱组织作阴性对照。 毕业论文 　　1.2 免疫组织化学方法 　　采用SP方法，一抗鼠抗人MMP2、TIMP2单克隆抗体、SP 试剂盒及DAB 显色试剂盒均购自武汉博士德生物有限公司。切片常规脱腊，逐级脱水，3.00% H2O2消除内源性过氧化物酶，抗原修复，依次加入一抗、二抗，DAB 染色，苏木素复染，透明封片。用试剂盒所带的阳性切片作阳性对照, PBS代替一抗作阴性对照。镜下观察肿瘤组织中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，高倍镜下随机选择5个高倍视野, 以阳性细胞百分率＞25.00%定为阳性，≤ 25.00%为阴性。 　　1.3 统计学处理 　　所有数据输入 计算 机，用统计软件SPSS11.5 处理。采用Fisher精确检验法，以Plt;0.05 为有显著性差异。 　　2 结果 　　2.1 膀胱癌的病理分级及临床分期 　　35例膀胱移行细胞癌中病理分级：G1占13例，G2占13例，G3占9例。临床分期：表浅性肿瘤共21例(其中Tis 占8例，T1占13例), 浸润性肿瘤共14例(其中T2占5例，T3占6例，T4占3例)。 　　2.2 MMP2和TIMP2的表达 　　5 例正常膀胱组织中MMP2和TIMP2的表达均呈阴性。16例膀胱移行细胞癌组织中肿瘤细胞有不同程度的MMP2表达,主要位于肿瘤细胞的胞浆,呈棕黄色。18例膀胱移行细胞癌组织中肿瘤细胞和间质细胞有不同程度的TIMP2表达。膀胱移行细胞癌中MMP2 和TIMP2的表达情况与肿瘤病理分级和临床分期的关系见表1。 　　2.3 MMP2和TIMP2与膀胱癌分化程度的关系 　　随肿瘤病理分级的增高,MMP2在膀胱癌组织中的表达显著增强(P＜0.05),说明分化差的膀胱癌MMP2的表达均明显高于分化好的膀胱癌。TIMP2也在肿瘤各级表达，但各级表达与分级的高低无显著性差异（P＞0.05）。 毕业论文 　　2.4 MMP2和TIMP2与膀胱癌浸润深度的关系 　 　　随肿瘤分期的增高,MMP2在膀胱癌组织中的表达显著增强(P＜0.05) , 说明浸润性膀胱癌MMP2的表达明显高于浅表性肿瘤; 而TIMP2在低期和高期肿瘤之间的表达无显著性差异（P＞0.05）。 　　表1 MMP2、T