舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠影响.docVIP

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舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠影响

舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠影响  作者:陈党红 孙良生 蔡业峰 黄培新 【摘要】 【目的】观察舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠的影响。【方法】选用SPF级SD大鼠,复制肌张力增高模型,将造模成功大鼠随机分为3组:模型组、巴氯酚组(剂量为135 mg·kg-1·d-1)、舒筋颗粒组(剂量为675 g·kg-1·d-1),连续给药12 d。比较各组治疗后不同时间点较治疗前肌张力改善的级数,并采用免疫细胞化学染色法检测各组大鼠脊髓组织γ氨基丁酸(GABA)表达情况。【结果】各组大鼠肌张力等级评分改善程度比较,治疗后3、6 d差异无显著性意义(Pgt;005),治疗后9、12 d,舒筋颗粒组、巴氯酚组与模型组比较差异均有显著性意义(Plt;005或Plt;001),而两治疗组间比较差异无显著性意义(Pgt;005)。与模型组比较,舒筋颗粒组和巴氯酚组均能降低脊髓后角GABA表达(Plt;005),而两治疗组作用相仿(Pgt;005)。【结论】舒筋颗粒治疗卒中后肌张力增高的作用可能与其能降低脊髓组织中GABA表达有关。 【关键词】 舒筋颗粒/药理学;肌张力增高/中药疗法;脊髓/病理学;疾病模型,动物;大鼠 肌张力增高是脑血管意外的常见并发症。由于该并发症限制了患者运动功能的恢复,很大程度上影响了患者日常活动能力和肢体康复效果,故这已成为康复治疗的难点之一。舒筋颗粒是中医脑病专家黄培新教授治疗卒中后肌张力增高的经验方,对改善由脑血管意外所造成的肢体痉挛有肯定的疗效[1]。γ氨基丁酸(gamma aminobutyric acid ,GABA)为中枢神经系统最重要的抑制性递质之一,也是药物降低肌张力的作用位点[2]。本实验通过观察舒筋颗粒对卒中后大鼠肌张力及大鼠脊髓后角GABA表达的影响,探讨舒筋颗粒降低肌张力的作用机理,现报道如下。   1材料与方法   11实验动物SPF级SD大鼠70只,体质量200~250 g,雌雄各半,分笼饲养。由广州中医药大学动物实验中心提供(合格证编号:0000590)。   12药物舒筋颗粒由江阴天江药业有限公司生产,由芍药、木瓜、甘草组成;巴氯酚由卫达化学制药股份有限公司提供(批号:T0150D),实验时大鼠用药量计算公式:m人用药/d×0018×5=m大鼠用药/kg。   13主要试剂与仪器SP试剂盒为美国BDBiosciences 公司产品;GABA试剂盒为美国Santa Cruz Biotechnology,Inc.公司产品;Q500型病理图像分析仪(德国LEICA);CX21型生物摄影显微镜(日本OLYMPUS );HM550型冰冻切片机(德国美康)。   14肌张力增高大鼠模型复制[3]将麻醉后的大鼠俯卧位固定于脑立体定位仪上,剃毛,常规消毒,沿正中线头皮下切开颅顶皮肤,暴露颅骨,于前囟后64 mm向左旁开矢状缝10 mm处颅骨表面用牙科钻钻孔,将固定在立体定向仪上的阳极针电极插入约 95~96 mm,阴极接鼠尾,以15 mA直流电通电作用22 s,拔出电极后缝合头皮,通过电流作用破坏内囊后肢的锥体束,复制肌张力增高模型。   15模型成功评定标准   151后肢运动评分采用改良的Tarlov分级评分法[4]。0级:完全瘫痪,不能做任何运动;1级:严重瘫痪,不能支撑身体,可以有轻微的运动,但不能做类似于爬行的动作;2级:瘫痪,不能支撑身体,但能够做爬行动作;3级:轻度瘫痪,能够支撑身体,但行走时不稳,有跛行;4级:无瘫痪,行走自如。   152肌张力评分采用Ashworth肌张力评分法[5],根据肢体被动活动及关节屈伸的自由度分为5级。0级:无肌张力增高,大鼠活动自如;1级:肌张力轻度增高,在屈伸过程中出现一过性停顿;2级:肌张力明显增高,但肢体尚易屈伸,有轻度共济失调;3级:肌张力明显增高,被动活动困难,有中度共济失调;4级:肢体屈伸受限,有重度共济失调。   16分组与给药将58只造模成功的大鼠编号,通过PEMS 31软件“完全随机(两组及多组)设计”程序产生随机数字,按3组1∶1∶1的比例随机分为模型组、巴氯酚组与舒筋颗粒组。模型组灌服蒸馏水2 mL,巴氯酚组按计算所得药量以135 mg·kg-1·d-1剂量灌服,舒筋颗粒组以675 g·kg-1·d-1剂量灌服,均每天1次,连续给药12 d。   17观察指标及检测方法   171肌张力改善情况按治疗前及治疗后3、6、9、12 d比较各组不同时间点肌张力改善级数差值。   172GABA检测方法采用光镜下观察和平均光密度分析(Mean)法。腹腔内注射10 mg/L的水合氯醛麻醉后开胸,沿剑突下剪开皮肤肌肉,暴露心脏;经左心室通过升主动脉直达主动脉弓处,剪开左心耳

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