孕晚期胎儿结膜上皮干细胞分布初步的分析研究.pdf

中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 、孑、＼ 论文作者签名：立盂叠 日期：迦§：￡三。 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在 攻读学位期间论文X-作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩 印或其他手段保存论文。 论文作者签名：- 盥 指导教师签名：毖如 一；，l ～中～ 匿 一要～ ；，．√ 一文一 一摘一 孕晚期胎儿结膜上皮干细胞分布初步研究 目 的 眼表上皮包括角膜上皮和结膜上皮，其结构和功能的完整性对于保持 眼表环境的稳态起到至关重要的作用。正常状态下，角膜和结膜上皮不断 进行自我更新和自我修复，更新的原动力来自眼表上皮干细胞。近年来，针 对角膜上皮于细胞的基础研究和临床应用已经取得丰硕的成果，而对于结 膜上皮干细胞的研究尚处于起步阶段。关于结膜上皮干细胞的定位，各家 研究仍然存在争论。研究多数集中于动物试验，而对于胎儿结膜上皮干细 胞的研究尚未见报道。我们利用免疫组织化学方法，对孕晚期胎儿结膜的 研究，推测结膜干细胞的分布规律，为进一步明确结膜干细胞的定位提供依 据。 方 法 实验材料取自正常引产或产后窒息死亡6小时内的孕晚期(胎龄28周 以上)胎儿8例(16只眼)，所有病例均无遗传病史及孕期感染病史，且取材 得到了医院及患者的许可。胎儿性别分布为5男3女。带眼睑取出完整眼 球，除去皮肤及皮下组织(保留睑缘)，切除后部巩膜。以眼科剪沿矢状面 剪取长条状眼球组织，包括睑缘、全部睑结膜、穹隆部结膜、球结膜及部分角 膜组织。多聚甲醛固定，常规石蜡包埋并制切片。常规染色观察，确定睑 缘、睑结膜、穹隆结膜、球结膜及角膜缘上皮细胞的位置及其形态结构。sP PCNA、P63的表达情况并进行图像采集。 结 果 PCNA及P63，在孕晚期胎儿睑缘皮肤粘膜交界处及角膜缘处表达相对 明显；P63在睑结膜亦见表达而PcNA未见表达；在球结膜和穹隆部，PCNA 和P63表达均不明显。MUC5A／C在睑缘、睑结膜、球结膜和角膜缘表达均 不明显，在穹隆部表达相对明显。角蛋白K7、K19在睑结膜、球结膜和穹隆 部均有较为明显的表达，在睑缘和角膜缘未见表达。AE5在整个结膜无表 达。 结 论 在孕晚期胎儿睑缘粘膜皮肤交界处和角膜缘处存在具有较高增殖活性 的细胞，提示结膜上皮干细胞可能存在于这两个部位。 关键词 胎儿；结膜上皮于细胞；定位；免疫组织化学 ·2． ontheLocalizationof PilotStIIdies ConjunctiVal inFetusesOlderThan28Weeks StemCeI