人卵巢癌细胞建系及及DC融合诱导CTL活性的的分析研究.pdf

摘要 目的 从人卵巢癌组织建立卵巢癌细胞系，以研究卵巢癌细胞的 生物学特性，并探讨卵巢癌细胞与树突状细胞的融合疫苗在体外抗肿 瘤的免疫反应。 方法取手术切除的卵巢癌组织，进行组织块培养，待长满90％ 汇合面后消化传代培养，并进行卵巢癌细胞形态学、生长动力学、裸 鼠致瘤性及免疫组化等生物学特性研究；用PEG法将卵巢癌细胞与树 养7d，然后与CA一125特异性T细胞共培养24hr，用细胞内染色法、 MTT法及流式细胞术分析检测融合细胞诱导CTL的活性。 结果该卵巢癌细胞系己在体外培养生存20个月，传90余代， 命名为湖南卵巢癌细胞系1号(HOCl)，其生物学特性显示：该细胞 系体外生长的倍增时间为47．2h,软琼脂集落形成率为18．5％；接种 至裸鼠后具100％致瘤性；染色体核型分析为非整倍体，众数为74～ 92条； 透射电镜下可观察到卵巢癌细胞表面含有丰富的微绒毛，胞 浆内含有丰富的核糖体，具有卵巢癌细胞的恶性表型。卵巢癌细胞与 自体或同种异体Dc融合后既能表达CA一125卵巢癌相关抗原，又能表 达MHC 胞能在体外诱导CTL活性。 结论该卵巢癌细胞系经体外长期培养并传90多代后已形成永 生化癌细胞系，并具有明显的恶性表型特征。卵巢癌细胞与自体或异 体树突状细胞的融合疫苗能在体外诱导抗卵巢癌CTL活性。 关键词卵巢癌，细胞系，细胞融合，肿瘤免疫，人类 ABSTRACT Toestablishanovariancarcinomacelllinefrom objectives humanovariancarcinoma areliable surgicalspecimen，whichprovide datafor mechanismof and medicine studying flaringup siftingthrought of ovariancarcinomaand the of effectofactivation treating explorer anti-tumorT invitrofusionofhumanovarian cytotoxiclymphocytes by Carcinoma Cellswith or dendriticCells． autologous allogeneic MethodsThe fromhumanovariancarcinoma explants biopsies were culturedin RPMI一1640media 10％ complete contmnning FCS，GM-CSF、IL一4．Afterto90％confluence．thecellswere growing for digestedsubculture，whose characteristics，includingmorphology, growth innudemicean