新型高效IDO抑制剂的筛选及其在肿瘤治疗中的作用的分析研究.pdfVIP

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2017-09-11 发布于安徽
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新型高效IDO抑制剂的筛选及其在肿瘤治疗中的作用的分析研究.pdf

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|JIIIIII I IIIIIII IIIIIllllI Y2701449 目录摘要……………………………………………………………………………………1 Abstract…．…．…．……………．．………………。…．……．…。．…．……．…………．…．…．…．…．………．…．…．2 前言………………………………………………………………………………………………………………．．3日U舌………………………………………………………………………………………………………………．．j 材料与仪器…………………………………………………………………………．．11 1．材料与试剂……………………………………………………………………1l 2．实验仪器………………………………………………………………………12 实验方法……………………………………………………………………………．．13 1．重组人IDO表达及纯化………………………………………………………13 2．rⅢD0生物活性测定…………………………………………………………．．15 2．1rhIDO活性检测体系建立…………………………………………………．15 2．2抑制类型测定………………………………………………………………16 2．3抑制剂Ki及Ic50值测定…………………………………………………16 2．4细胞水平IDO抑制活性测定……………………………………………．．18 3．分子模拟对接…………………………………………………………………20 4．T细胞增殖反应……………………………………………………………．．20 5．LLC肿瘤小鼠实验…………………………………………………………一2l 5．1Lewis肿瘤模型建立………………………………………………………．21 5．2实验分组……………………………………………………………………21 ，5．3 IDO活性(Kyn／Trp)检测………………………………………………．．21 5．4小鼠肿瘤组织中IDO与Foxp3的基因表达……………………………．．21 5．5小鼠肿瘤组织中IDO与Foxp3的蛋白表达……………………………．23 5．6免疫组化检测IDO与Foxp3的表达情况………………………………．．24 实验结果……………………………………………………………………………．．26 1．rhIDO的表达与纯化…………………………………………………………26 2．IDO活性检测体系的建立…………………………………………………．．26 3．HEK293细胞瞬转结果鉴定…………………………………………………27 4．IDO抑制剂的筛选…………………………………………………………．．27 4．1CX系列IDO抑制活性的初筛……………………………………………27 4．2抑制类型判定及Ki、IC50的测定…………………………………………28 万方数据 4．3CX系列细胞水平抑制效果……_………………………………………．．29 5．分子模拟对接分析……………………………………………………………30 l 6．CX系列对T淋巴细胞增殖影响……………………………………………3 7．CX-47体内抗肿瘤作用………………………………………………………32 7．1CX-47对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的影响………………………………32 7．2CX．47对LLC小鼠中IDO活性影响……………………………………．32 7．3CX．47对IDO基因和蛋白水平的影响……………………………………33 7．4CX．47对Foxp3基因和蛋白水平的影响…………………………………34 7．5免疫组化检测IDO和Foxp3的