食品微生物学检验 沙门氏菌检验-标准文本.docVIP

前 言 本标准代替GB 4789.4-2010《食品微生物学检验 沙门氏菌检验》、SN 0170-1992《出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法》、SN/T 2552.5-2010 《乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第5部分：沙门氏菌检验》。 整合后的标准与以上标准相比，主要变化如下：——标准名称修改为“食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验”； ——增加了不同食品种类的前处理及增菌的操作程序； ——修改了设备和材料、培养基和试剂；——修改了检测流程和血清学检测操作程序； ——修改了原国家标准附录B； ——删除了标准的中英文名称食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella）除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 冰箱2 ℃～5 ℃。 恒温培养箱36 ℃±1 ℃，42 ℃±1 ℃。 均质器。 振荡器。 电子天平感量0.1 g。 无菌锥形瓶容量500 mL250 mL。无菌容量500 mL。无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。 无菌培养皿直径90 mm。 无菌试管：3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。 无菌毛细管。 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 全自动微生物生化鉴定系统。 缓冲蛋白胨水（BPW）：见附录A中A.1。：见附录A中A.。 ：见附录A中A.。 ：见附录A中A.。 ：见附录A中A.。 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液：见附录A中A.。（）增菌液：见附录A中A.。 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：见附录A中A.。 亚硫酸铋（BS）琼脂：见附录A中A.。 HE琼脂：见附录A中A.。 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂：见附录A中A.。 沙门氏菌属显色培养基。 三糖铁（TSI）琼脂：见附录A中A.。 蛋白胨水、靛基质试剂：见附录A中A.。 尿素琼脂（pH 7.2）：见附录A中A.。 氰化钾 （KCN） 培养基：见附录A中A.。 赖氨酸脱羧酶试验培养基：见附录A中A.。 糖发酵管：见附录A中A.。 邻硝基酚β-D半乳糖苷（ONPG）培养基：见附录A中A.。 半固体琼脂：见附录A中A.。 丙二酸钠培养基：见附录A中A.。 沙门氏菌O和H诊断血清。 生化鉴定试剂盒。 4 检验程序 沙门氏菌检验程序见图1。 图1 沙门氏菌检验程序 5 操作步骤 5.1 前增菌 5.1.1 解冻和保存样品 检验前冷冻样品最好不要解冻，如果冷冻样品必须软化以取其检测部分，应在45 ℃以下不超过15 min，或2 ℃～5 ℃不超过18 h解冻。若不能及时检验应置于15 ℃左右保存。非冷冻而易腐的食品，置于4冰箱保存。 无菌操作称取25 g（mL）样品，置于盛有225 mL BPW的灭菌均质杯内，以8 000 r/min～10 000 r/min均质1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需调整pH值，用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500 mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36 ℃±1 ℃培养8 h～18 h。 5.1.3 肉制品 无菌操作称取剪碎后的肉类样品25 g，置于灭菌均质杯内，加入25 mL BPW，以8 000 r/min～10 000 r/min均质1 min～2 min，移入盛有200 mL BPW的500 mL广口瓶或其他合适容器内，混合均匀。如需调整pH值，用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2，充分混匀。于36 ℃±1 ℃培养8 h～18 h。 5.1.4 即食蛋制品 5.1.4.1 冰蛋品 按5.1.2进行。 5.1.4.3煮硬的蛋 无菌剥离蛋壳，无菌操作压碎蛋白和蛋黄，称取25 g置于灭菌的500 mL锥形瓶或其他合适容器内，加225 mL TSB，并振荡充分混匀。在室温下静置60 min，振荡使其充分混匀。如需调整pH值，用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2，充分混匀。将瓶盖旋松1/4转，于35 ℃±1 ℃培养24 h±2 h。 5.1.5 巧克力类及可可制品 无菌操作称取25 g样品置于灭菌的搅拌容器内，加入225 mL再造脱脂奶粉，搅拌2 min。再无菌操作转移搅拌过的混合物到灭菌的带螺旋帽500 mL广口瓶或其他合适容器内。盖紧瓶盖在室温下静置60 min，转动混匀。如需调整pH值，用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2，再加入0.45 mL 1%煌绿水溶液混匀。将瓶盖旋松1/4转，于35 ℃±1