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2017-10-12 发布于湖北
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第九章基因工程和基因组学第一节基因工程

(DNA ) 2 1971 Smith DNA DNA 1972 Berg l DNADNA DNA 1973 Cohen DNA DNA E. cloi 1982 1985 1994 1996 1996 170 1997 1100 1998 2780 1999 3990 2000 4420 2001 5260 2002 5000 2001 100 3330 hm263%980 hm2 19% 680 hm2 13% 270 hm2 5% 50 3570 hm21180 hm2320 hm2 150 hm2 3 DNA DNA DNA DNA DNA DNA DNA DNA (Clone) 1. (restriction enzyme) DNA DNA DNA DNA DNA EcoR (palindrome) DNA DNA DNA :DNA DNA , :DNA DNA vector DNA DNA DNA DNA DNA . .(multiple cloningsiteMCS Polylinker region) . . DNA DNA 1-2 20-60 () 49kb DNA 2/3 DNA DNA 15-23kb DNA cDNA DNA (cosmid) DNA + DNA cos 50kb DNA shuttle vectors (Auto-nomously replicating sequence, ARS) (Bacterial artificial chromosomeBAC) BAC 50kb DNA F BAC 100kb DNA DNA BAC (7.4kb) (yeast artificial chromosomeYAC) YAC 100-1000kb DNA YAC (human artificial chromosomeHAC) Ti à DNA Ti ()(Agrobacterium tumefaciens)à (tumor-Inducing, Ti) à (grown galltumors)Ti DNA DNA (transfer DNAT-DNA) T-DNA (opine) DNA DNA DNA DNA DNA DNA 10 DNA 1.DNA 2.DNA + DNA 3.DNA DNA 1.library DNA cDNA cDNA 2. (DNAcDNA ) (Probe) 3. PCR (polymerase chainReactionPCR)DNA Mullis(1986) PCR () 194-95 DNA 250-70 DNA 3Taq 72 DNA PCR 25-35 5kb RAPD AFLP DNA 1. (80-100 )SOE 2. PCR DNA 3. DNA 4SOE 5PCR DNASOE-PCR (1982) 10 1 35SDNA Ti RB LB DNA 2 DNA : +DNAà DNA DNA DNA (gene therapy) DNA (retro virus DNA) DNA DNA (DNA chips) + DNA (2cm) () DNA

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