泥蚶胰岛素生长因子1受体基因的cdna全长克隆及表达分析-水产学报.pdf

第41 卷 第 1 期 水 产 学 报 Vol. 41, No. 1 2017 年 1 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Jan., 2017 文章编号: 1000-0615(2017)01-0040-12 DOI: 10.11964/jfc.20151210197 泥蚶胰岛素生长因子1受体基因的 cDNA全长克隆及表达分析 1,2 1 2 1 1* 任付真 ， 姚韩韩 ， 钱雪骏 ， 林志华 ， 董迎辉 (1. 浙江万里学院生物与环境学院，浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室，浙江 宁波 315100; 2. 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306) 摘要：为了研究IGF 1R 基因在泥蚶生长、发育过程中的调控作用，本研究基于泥蚶转录 组文库的EST ，利用SMART RACE技术首次克隆获得泥蚶IGF 1R 基因(Tg-IGF 1R) cDNA全 长序列，该序列全长为5793 bp ，开放阅读框为4638 bp ，编码1546个氨基酸。经生物信息 学分析发现，该基因5′端非编码区为810 bp ，3′端非编码区为345 bp ，Tg-IGF1R蛋白分子 量为176.01 ku，等电点为6.04 ，包含4个Ⅲ型纤粘连蛋白结构域，1个半胱氨酸富集区和 1个酪氨酸激酶结构域，属于亲水性跨膜蛋白质。氨基酸多重比对显示Tg-IGF1R蛋白序 列与人、非洲爪蟾、斑马鱼的相似性分别为45.2% 、45.6%和45.4% 。利用qRT-PCR技术 检测了Tg-IGF 1R 基因在泥蚶成体不同组织及幼体不同发育时期的表达情况，发现该基因 具有广泛的组织表达性，在所检测的6个组织(血液、闭壳肌、斧足、鳃、内脏团和外套 膜) 中均有不同程度的表达，其中血液中的相对表达量最高，并与其余5个组织间存在显 著性差异，推测Tg-IGF 1R 以信号分子的形式参与多种组织细胞的生命过程。Tg-IGF 1R 基 因在泥蚶个体发育过程中的9个时期均有表达，且高表达主要集中在原肠胚期，其次是 担轮幼虫期和稚贝期，说明Tg-IGF 1R基因可能在早期发育阶段参与了某些器官的形成。 关键词: 泥蚶；Tg-IGF 1R基因；克隆；表达分析 中图分类号: Q 785 ；S 917.4 文献标志码: A [8-10] [11-12] 胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors, 彻 。在其他高等动物，如绵羊(Ovis aries) 、 IGFs) 由2个生长因子(IGF-1 、IGF-2) 、2个生长因 小鼠(Mus musculus)[13-14] 、鸡(Gallus domestiaus)[15-16] 子受体(IGF1R 、IGF2R)和6种高亲和力结合蛋白 等中也展开过许多研究，而软体动物葡萄牙牡 [ 1] 蛎(Crassostrea angulata) 中仅有该基因组的克隆分 (I