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高分子量透明质酸的发酵研究
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2004,35(5) ·269 ·
微生物药物与生化药物
高分子量透明质酸的发酵研究
田毅红，蔡海波，陆仕灿，谭文松*，许建和
(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237)
摘要：采用兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)进行分批补料发酵生产透明质酸(HA)。结果表明：采用葡萄糖初
6
始浓度为4％，分批补加葡萄糖，使其浓度控制在2％，可使HA的产量达到3.4g/L，平均分子量2.45×10Da。若
6
加入0.75g/L尿苷一磷酸，HA的产量可提高20.6％，达4.1g/L，平均分子量2.87×10Da。
关键词：透明质酸；分批补料发酵；兽疫链球菌
中图分类号：TQ929 文献标识码：A 文章编号：1001-8255(2004)05-0269-03
透明质酸(hyaluronic acid ，HA ，1)是由N- 乙 种子培养：摇瓶于3 7 ℃培养8h 。
酰胺基葡萄糖(GlcNAc)和葡萄糖醛酸(GlcUA)为双 发酵培养：5L 全自动发酵罐(华东理工大学)中
糖单位聚合而成的酸性高分子粘多糖，具有良好的保 装液2 .5L 。罐温37 ℃，pH 7.0 ，通气量2.4L/min ，
湿性和黏弹性，可用于制备化妆品。高分子量的1 具 初始搅拌转速150r/min ，然后逐渐提高到600r/min ，
有较高的黏弹性，在眼科手术中可作为填充剂，具有 接种量5 ％。pH 用6mol/L N aOH 溶液自动调节。
良好的市场前景。本文以兽疫链球菌(Strep tococcus 1.3 测定方法
zooep idemicus)发酵制备1，考察了发酵初始和培养 菌体浓度：6 6 0n m 处测定吸收度A 。
[1]
过程中葡萄糖浓度及添加尿苷一磷酸(UMP)对1 发 葡萄糖含量测定：3, 5- 二硝基水杨酸法 。
[2 ]
酵的影响，初步优化了1 的发酵条件，产量和分子 1 含量测定：按文献 操作，以葡萄糖醛酸内
量都得以提高。 酯为对照品。
[3 ]
1 材料与方法 1 分子量的测定 ：用毛细管直径为0 . 7 ～
1.1 菌种和培养基 0.8mm 的乌式黏度计于25 ℃测定黏度，参比液为
菌种：兽疫链球菌Strep tococcus zooep idemicus (本实验 0.2mol/L N aCl 溶液，三点外推计算出特性黏度 ，
室保存)。 根据公式 ＝0.036M 0.78 计算1 的分子量M 。
斜面培养基/％：葡萄糖0.2 ，牛肉膏1.0 ，
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