多形白僵菌（Beauveria+amorpha）代谢物中单胺氧化酶抑制剂的的分析研究.pdfVIP

摘要 在一次对供试菌株抑制单胺氧化酶活性物质的筛选过程中，发现一株多形白僵 菌菌株Ba02【口wPr抽盯研。伊砌(Hollll．)vonArXl发酵液的代谢产物具有很强的抑制 单胺氧化酶活性。本试验就是建立在此基础上展丌了进‘步的研究。主要内容包 括：发酵液乙酸乙酯萃取脂溶相样品半数抑制浓度(Ic50)及其动力学特征的研究； 最佳发酵时间的确定；活性组分的分离提取工艺和纯化技术路线：甲醇提取物的体 内活性研究；单一化合物的结构鉴定。 菌株发酵液脂溶相组分对MAo的抑制活性呈量效关系，经计算得出其对MAO—A、 O．47×10一5moI．L-。、O．11×lO一5m01．L～。 应用薄层层析试验得出：Ba02菌株的最佳发酵时间为10．5d。 通过对最佳浓缩温度、萃取试荆、萃取体积比、萃取次数的筛选试验，确定了 70％)醇沉，弃沉淀并脱醇后，以乙酸乙酯为萃取试剂，2：1的体积比进行萃取， 分三次萃耿，取脂浴相，脱去乙酸乙酯有机溶剂后冷冻干燥。 本试验采用硅胶吸附层析色谱对粗提物进行初步纯化，通过薄层层析进行最佳 流动相筛选，结果表明：Ba02菌株脂溶相组分在展开剂为乙酸乙酯：甲醇：水 分的柱层析洗脱剂。 由于初步纯化已得到了较好的分离效果，本试验直接应用高效液相色谱进行进 一步纯化，最终得到四个纯度较高的纯品。应用薄层层析法(TLC)、高效液相法 (86％)的组分儿-l的结构进行了相关的研究。 天然产物数据库查询，该化合物为一己知化合物。数据库中有关该化合物的理化性 质描述与本研究分离得到的完全一致。因此可知本研究所得到的MAO抑制剂为节卵 孢素(Oosporein)，此种化合物对MAO的抑制活性尚属首次发现。 Ba02菌株甲醇提取物具有良好的抑制单胺氧化酶．A作用。且在对未预知的慢性 小鼠抑郁模型脑组织线粒体单胺氧化酶活性的测定中发现，Ba02菌株甲醇提取物在 泰缝俘蒋、够船漕趣 白垒文公帮 均有明显的抑制作用，并呈现一定的量效关系。 关键词：多形白僵菌(BP口“v盯胁口脚。伊^“)，单胺氧化酶抑制剂，生物活性，分离纯 化，结构鉴定 II ABSTRACT A ofmono锄ineoxid蠲e(MAO)in圭libitive metaboliteof screenjng activ时of r“ealedmattlle ex删f幻mfe肋emationbm廿lofa entomogenous如ngi e也yl越etate s仃ainof inhibitory MAO．nleextract 6e口we，曲口mo，p妇Ba02exhibi倒s仃ongactiV时on w鹪testedfor somerelatedfactors i乜IC50，虹netics拄ait’and includ洫goptimal and ferrnentation ex衄扯tion ofbio犹tive time，s印a枷on， purifica正on vivo ofmem卸olextr；∞t觚ds加lctIl豫idemification activiq ofpllIifiedcompound． TheinhibitiononMAO—AandBofthc ex廿act舶mBa02showedadose·