2 塔板、速率理论.pptVIP

第二节 色谱法基本原理 色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，组分要达到完全分离: 1.两峰间的距离必须足够远 分配系数-色谱过程的热力学性质有关。 2.峰宽 传质和扩散行为-色谱过程的动力学性质有关。 因此，要从热力学和动力学两方面来研究色谱行为。 一、塔板理论 （一）精馏塔与塔板理论 1952年，马丁（Martin）和欣革（Synge）最早提出塔板理论（Plate theory)，将色谱柱比作蒸馏塔，把一根连续的色谱柱设想成由许多小段组成。在每一小段内，一部分空间为固定相占据，另一部分空间充满流动相。组分随流动相进入色谱柱后，就在两相间进行分配。并假定在每一小段内组分可以很快地在两相中达到分配平衡，这样一个小段称作一个理论塔板（theoretical plate），一个理论塔板的长度称为理论塔板高度（theoretical plate height）H。经过多次分配平衡，分配系数小的组分，先离开蒸馏塔，分配系数大的组分后离开蒸馏塔。由于色谱柱内的塔板数相当多，因此即使组分分配系数只有微小差异，仍然可以获得好的分离效果。 （二）塔板理论的四个基本假设 1．在柱内一小段高度内组分分配瞬间达平衡 （H→理论塔板高度） 2．载气非连续而是间歇式（脉动式）进入色谱柱， 每次进气一个塔板体积 3．样品和载气均加在第0号塔板上，且忽略样品 沿柱方向的纵向扩散 4．分配系数在各塔板上是常数 图示 图示 （四）色谱峰的正态分布（N50次）→近似对称分布 流出曲线近似为高斯分布 讨论： （五）色谱柱分离效率的评价 1、柱效的概念 柱效是指一个色谱柱对混合组分的分离能力或分离效率。 若在一根色谱柱上所能分离的组分多，分离完全，则说明该柱的柱效高。 2、理论板数和理论塔板高度的计算 理论塔板高度H —为使组分在柱内两相间达到 一次分配平衡所需要的柱长 理论塔板数N——组分流过色谱柱时，在两相间 进行平衡分配的总次数 续前 练习 例： 在柱长为2m的5%的阿皮松柱、柱温为1000C，测定苯的保留时间为1.5min，半峰宽为0.10min，求理论塔板数和板高。 解： 二、速率理论 （一）塔板理论优缺点 （二）Van Deemteer 方程式 （一）塔板理论优缺点 成功处： 解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大值对应的tR 阐明了保留值与K的关系 评价柱效（n，σ） 存在问题: 1）做出了四个与实际不相符的假设 忽略了组分在两相中传质和扩散的动力学过程 2）只定性给出塔板高度的概念，却无法解释板高的 影响因素 3）排除了一个重要参数——流动相的线速度u， 因而无法解释柱效与流速关系 更无法提出降低板高的途径 （二）Van Deemteer 方程式 吸收了塔板理论的有效成果——H， 并从动力学角度较好地解释了影响柱效的因素 1. 涡流扩散项（多径扩散项）：A 产生原因：载气携样品进柱，遇到来自固定相颗粒的阻力→路径不同→涡流扩散 next 影响因素：固体颗粒越小，填充越实，A项越小 图示 back 2. 纵向扩散项（分子扩散项）：B/u 产生原因： 峰在色谱柱中被流动相推动向前、展开 →两边浓度差 影响因素： 续前 注：为降低纵向扩散，宜选用分子量较大的载气、控制较高线速度和较低的柱温 纵向分子扩散使峰展宽 （a）柱内谱带构形 （b）相应的响应信号 3. 传质阻抗项：C·u 产生原因：样品在气液两相分配，样品未及溶解就 被带走，从而造成峰扩张 影响因素： 续前 讨论： 注：固定液应完全覆盖载体表面，不可以太薄， 否则柱子寿命短，k太小； T不可以超过固定液最佳使用温度 流速与柱效的关系 三、分离度Rs 分离度：相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值（衡量色谱分离条件优劣的参数） 讨论： Rs是用来反映柱子对相邻组分的分离效果，它是两峰重叠程度的量度，R值越大，表明相邻两组分分离越好。 通常用Rs=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志，即“基线分离”。 四、基本分离方程 前提——定义式基础上，相邻两组分的n一致（假设） 1．柱效因子及其影响因素：