低渗性肿胀对豚鼠心室肌细胞动作电位及延迟整流钾电流（I-%2cK-）影响的实验的分析研究.pdfVIP

天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要 摘 要 目的：心肌细胞肿胀通常发生于急性心肌缺血及再灌注阶段，细胞肿 胀后由于膜受到牵张，给细胞以机械性刺激，引起细胞电生理性质的改变。 其中最主要的是多种离子通道的功能受到调节，进而改变动作电位的电生理 参数，诱发心律失常的产生。本实验通过低渗液灌流急性分离的单个豚鼠心 室肌细胞来模拟这种改变，本实验研究目的在于：1．观察单个心室肌细胞的 动作电位各参数在低渗液灌流时发生的变化，探讨低渗性肿胀引起心律失常 的机制。2．研究动作电位主要复极期电流一延迟整流钾电流(I。)及其快、 慢两种激活成分(I。，及I。。)的通道动力学特征。3．研究低渗性肿胀对I。，及 I。，离子通道的不同调节作用，用以部分解释缺血一再灌注心律失常发生的 离子机制。 t方法：用主动脉逆向灌流法酶解分离得到单个豚鼠心室肌细胞，在倒置 相差显微镜下，选择质膜完整、横纹清晰的心室肌细胞，用等渗台式液 破膜、电容及串连电阻的补偿形成膜片钳全细胞记录状态。以刺激脉宽3ms， 动作电位，并测量动作电位振幅(APA)、静息膜电位(RMP)及动作电位 待动作电位变化稳定后，再重复记录及测量上述参数并与等渗液灌流加以比 液灌流的心室肌细胞以记录延迟整流钾电流(I。)，灌流液改为低渗液后重 复记录I。，测量各去极化电压下的峰值电流幅度及尾电流幅度，失活时间 常数(t)并绘制电流一电压关系曲线(I—v曲线)，与等渗液灌流相比较。 结果：1．低渗性肿胀对心室肌细胞动作电位APA、RMP及阈电位水平 天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要 无影响。2．三种刺激周长下的APD在细胞低渗性肿胀状态下明显缩短，生 理性频率适应性消失，且以APD50及APD90缩短为明显。3．低渗性肿胀可 以使I。。峰值电流幅度及尾电流幅度均明显增加，并且呈平行增加的关系， 的I—V关系曲线显示，低渗液灌流下I—V关系曲线向左上移位，电流幅 时间常数(t)降低，提示通道激活及失活的速度可能有所加快。p厂 结论：1．低渗性肿胀不影响心室肌细胞的兴奋性和传导性。2．APD尤 其是APD50及APD90在低渗性肿胀状态下的缩短，说明低渗性肿胀主要影 响动作电位的平台及3相复极相，可能诱发折返性心律失常的发生。3．低渗 性肿胀状态下I。的两种成分出现不同变化，提示低渗性肿胀对细胞膜离子 通道有调节作用。4．肿胀的心室肌细胞I。。明显增加，提示它在心室肌细胞 渗透性电信号传导机制中可能起重要作用，是低渗性肿胀APD缩短的重要 的离子机制。 关键词：■低渗性肿胀 一心室肌细胞 一缺血再灌注 一离子通道 ■全细胞膜片钳 一延迟整流钾电流 ●恢激活成分／一慢激活成分／1动 作电位时程 2 天津医科大学硕士研究生论文 英文摘要 ABSTRCT of cardiac occurs acute myocytes Objectives：Swelling during myocardial ischemia andthisis exacerbatedafter electro- episode reperfusion．The of alterasa resultofthemembrane myocytes physiologicalproperties mechanical thecell can stretchingduring