表皮生长因子及胚胎发育及着床.doc

表皮生长因子及胚胎发育及着床 　关键词：表皮生长因子胚胎发育着床 　　摘要　胚胎着床过程的调节十分复杂，近年来细胞生长因子参与胚胎发育和着床的功能研究十分热门，在细胞生长因子发挥作用的网络中，表皮生长因子起着举足轻重的作用，是着床过程顺利完成不可缺少的因子之一。本文就表皮生长因子改善胚胎发育、启动胚胎着床、调节植入过程等内容进行简要综述。 　　关键词：表皮生长因子胚胎发育着床 　　自1962年Cohen从雄鼠颌下腺分离提纯出表皮生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）以来，已证明EGF对多种组织来源的细胞增殖具有明显的促进作用。除颌下腺以外，人体的多种组织也EGF分布，如：十二指肠的Brnners腺、含中性粘蛋白的胃粘膜细胞系、外分泌腺体以及多种肿瘤细胞等。EGF还常见于包括精液、羊水在内的正常体液中。已经证实，在子宫内膜、蜕膜、着床前胚胎、滋养层细胞等生殖组织中存在EGF和/或EGF受体（EGF-R），EGF通过自分泌、旁分泌和内分泌途径，单独或通过细胞因子网络（cytokinenet），参与内膜准备、胚胎发育、植入过程、妊娠维持、胎盘激素合成分泌等生理过程的调节[1～3]。 　　一、表皮生长因子及其受体 　　小鼠EGF是一种含53个氨基酸的单链多肽，编码小鼠EGF的信使核糖核酸（mRNA）含4800对碱基，翻译出的EGF前体有1217个氨基酸残基，含数个糖基位点，与低密度脂蛋白（LDL）序列相似，因而EGF前体可能是一种有受体功能的膜糖蛋白。成熟的EGF分子内含3个二硫键，活性中心位于48～53个氨基酸残基之间，分子量为6.045kd，等电点4.6，耐热及耐胰蛋白酶、糜蛋白酶。不同种类的EGF虽然氨基酸数量和排列有差别，但存在一定的交叉反应。，人EGF首次从尿液中提取出来时，称作尿抑胃素（urogastrine），其生物学活性及氨基酸序列与小鼠EGF相似。 　　EGF-R是一种糖蛋白，广泛分布于哺乳动物的上皮细胞，是一条被质膜分为内、外两个区段的单一多肽链。EGF-R含1186个氨基酸残基，分子量170kd，富含甘露糖。人的EGF-R基因位于第7号染色体短臂上。除细胞膜外，核内也EGF-R分布，二者具有相同的抗原性。EGF-R的结构和功能在不同种属动物中基本相似，分子进化较保守。EGF-R本身具有蛋白激酶的活性，与配体的结合具有特异性、高亲和性等特点[1]。EGF-R在胎盘的分布比在子宫内膜、蜕膜等处要高1000倍，而且主要分布于合体滋养层[4]。 　　EGF家族的成员为数不少，由于它们的受体相同，因此或多或少地参与了胚胎的发育和着床的过程，研究较为广泛而深入的是EGF，其次是转化生长因子（TFG）和肝素结合表皮生长因子（HB-EGF），Amphiregulin、Cripto、Betacellulin、neu以及Epiregulin与着床的调节只有少量报道[5]。 　　二、EGF与早期胚胎发展 　　着床的先决条件是胚胎的正常发育和脱透明带。Morita[6]用EGF处理体外培养的胚泡，然后移植入同步发情、处于假孕第4d受体母鼠的子宫内，结果着床率为77.9%，与在体内胚泡的发育接近，为84.2%，而体外培养未加EGF有胚泡，移植后的着床率只有57.1%。其原因可能是EGF显著刺激小鼠胚泡滋养层细胞的外延生长，增加与子宫内膜的粘附。Taga[7]1992年的实验显示，EGF对小鼠2细胞的发育不表现出明显的效应，只在桑椹胚以后，EGF自分泌和旁分泌才对胚胎的发育起作用。然而Buyalos[8]发现，将小鼠2细胞胚胎培养在EGF含量为2～100mg的培养液中，72h后，完全扩展和正在孵化的胚泡的比例明显高于对照组，且EGF的促进作用可被抗EGF抗体所阻断。Terual[9]将小鼠2细胞胚胎单独培养时，EGF可明显增加胚胎的分化生长速率，证明EGF对小鼠2细胞胚胎的生长有促进作用。EGF是否作用于早期胚胎取决于胚胎EGF-R的有无及活性，免疫荧光测定出小鼠未受精卵细胞和2细胞胚胎中呈现很弱的EGF-R荧光，4细胞以后各期，荧光逐渐增强。除滋养层细胞外，内细胞团中也EGF-R的表达，RT-PCR测出4细胞后EGF-RmRNA显著长高，说明从8细胞开始合成的受体蛋白源自胚胎的mRNA，而受精卵和2细胞胚胎内的mRNA则可能是母源性的[10]。 　　Merriman[11]将未受精的小鼠卵细胞在EGF的培养液中进行成熟处理，受精后分裂至2细胞阶段的能力高于对照组，将这些2细胞胚胎移植人受体假孕小鼠后，着床率为64%～78%，略低于正常着床率89%。Grupen[12]用EGF处理猪的卵细胞，发现能提高进行减数分裂的成熟卵细胞的比例，源于这些卵细胞受精后囊胚的形成率比对照组高，此结果表明，EGF对