RFC1A80G多态性与中国汉族儿童ALL易感性有关.PPT

暴露于相同危险环境因素的儿童,其ALL发病的差异是由遗传易感性（susceptibility）来决定的 研 究 目 的 了解在健康儿童和ALL白血病儿童中RFC1 80位点基因型分布特征 探讨RFC1 A80G多态性与儿童ALL易感性之间的关系 研 究 对 象 ALL组 45例，2008.10-2010.2儿科和血液内科住院的初治ALL儿童。男28例，女17例，年龄1-16岁，中位年龄5.53岁。 对照组 70例，同期门诊体检健康儿童。男45名，女25名，年龄1-14岁，中位年龄5.31岁。 两组均为华南地区出生汉族儿童 结 果 讨 论（1） 华南地区汉族健康儿童的RFC1 80A等位基因频率为45.7% 讨 论（2） RFC1 80AA可显著性增加儿童ALL的患病风险 一方面，位于TMD1内的组氨酸碱性相对较弱，可改变RFC转运功能，引起叶酸摄取率 以及甲硫氨酸循环中的Hcy ，致使该循环转甲基能力 （Whetstine et al, 2001） 另一方面，含RFC1 80A等位基因的个体的淋巴细胞微核率较其它基因型者明显 ，严重影响了染色体的稳定性 (Dhillon et al, 2009 ) 结 论 RFC1 A80G多态性频率特征在不同种族或地域人群间存在差异； RFC1 A80G多态性与中国汉族儿童ALL易感性有关，其中RFC1 80A等位基因可增加患病风险。 还原叶酸载体基因多态性与儿童ALL易感性的关系研究 杨丽华 余晶 王斌 南方医科大学珠江医院 儿科中心 研 究 背 景 急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia， ALL）为最常见的儿童恶性肿瘤，约占25-30% 病毒 感染 基 因 环 境 病因？ 现普遍认为，ALL的发生为基因-环境相互作用所致 理化 因素 遗传 素质 危险环境 Cancer Cancer-free 基因多态性 Susceptibility: Metabolism, DNA damage repair… RFC 5-MeTHF 图 1. 叶酸代谢途径 Dhillon et al.Mutat Res 2009; 665: 1-6 叶酸代谢相关 基因的多态性 影响细胞的叶酸代谢 干扰正常DNA 合成和甲基化 ALL？ （Reduced folate carrier, RFC） 还原叶酸载体基因RFC1位于21q22.2-q22.3,编码一个含591个氨基酸的完整的膜蛋白,包含12个跨膜区(transmembrane domain，TMD) 还 原 叶 酸 载 体 分生结构 第2外显子第80位核苷酸具有高频率的A →G多态可引起第27位密码子His→Arg 多态性 ①与正常人群的血浆叶酸和同型半胱氨酸水平有关 ②可能影响儿童ALL的遗传易感性、疗效、预后等 特性 研 究 方 法 1.采集外周静脉血，抽提基因组DNA 2.PCR扩增 3.DNA片段大小检测及回收纯化 4.DNA测序 5.统计学处理 500bp 400bp 300bp 200bp 150bp 100bp 50bp 140bp M 1 2 3 4 5 6 7 图2 RFC1基因第2外显子含80片段PCR产物2%琼脂糖凝胶电泳 M：Marker 1-7：分别为ALL标本1-7 A B C 图2　 RFC1基因第2外显子含80片段的测序图 A.野生型(His27His) ：CAC B.杂合子突变型(His27Arg)：CNC (N代表A/G杂合) C.纯合子突变型(Arg27 Arg)：CGC 1.21 1.603 14.6 12 34.7 40 20.6 18 对照组 0.71 0.134 17.4 18 21.2 20 6.4 7 ALL组 期望值 观察值 期望值 观察值 期望值 观察值 P χ2 AA GA GG 组别 表1 RFC1 80基因型分布及Hardy-Weinberg平衡检验 拟合优度χ2检验结果： 两组人群均符合H-W遗传平衡(df=2，P0.05)， 说明这两个研究人群来自大的群体，不存在明显的自然选择、 迁移等因素对遗传平衡的影响 12（17.1） 40（57.1） 18（25.7） 70 对照组 18（40.0）* 20（44.4） 7（15.6） 45 ALL组 AA AG GG 基因型频率 例数 组别 *ALL组与对照组相比，χ2=7.633，P=0.02 表2 两组RFC1基因80位点基因型频率分布 表3 两组RFC基因80位点G、A等位基因频率分布 64(45.7