冬凌草提取物对大鼠长期毒性实验探究.docVIP

冬凌草提取物对大鼠长期毒性实验探究 　 作者：姚会枝，李吉学，郑海娜 【摘要】 目的观察连续灌胃给予冬凌草提取物对大鼠产生毒性反应。方法冬凌草醇提物40，20，10 g/kg连续灌胃给药12周，观察给药期间大鼠的一般状况及可能出现的毒性反应，给药结束时测试大鼠血常规及凝血时间，血液生化指标，称脏器重量，计算脏器系数及病理组织变化。结果3个给药组分别与对照组比较大鼠一般状况未见明显异常，各种血常规和血液生化指标、脏器系数及组织结构也均未见明显异常。结论冬凌草提取物长期连续灌胃未见毒性反应，长期服用安全。 【关键词】 冬凌草提取物； 长期毒性； 急性肝损伤； 大鼠 　冬凌草系唇形科香茶菜属植物的干燥叶及其地上部分，1991年收入部颁中药材标准。冬凌草味甘苦、性微寒，具有清热解表、消炎止痛、健胃活血及抗肿瘤等作用［1］。冬凌草及其主要活性成分的良好作用和它们在毒性实验中显示的无明显毒性，引起了国内外学者的广泛关注，近30年来国内外学者对冬凌草及其同属植物进行了多方面的研究［2］。由于冬凌草与人类健康的关系密切，近年来日益受到人们的重视，被开发成多种保健食品，如冬凌草茶等，但对其长期服用毒理学方面的报道较少。为探讨冬凌草长期服用的安全性，我们对其进行了长期毒性实验研究。 　　1 器材 　　1.1 药物冬凌草提取物的制备： 冬凌草于2008-07购自河南省济源市药材公司。将冬凌草干燥叶及其地上部分5 kg粉碎成粗粉，用95%的乙醇为溶剂进行冷浸提取，提取液合并减压浓缩至膏状，加3倍量的水溶解，滤过，弃去固体，滤饼合并干燥得绿色粉末。取供试品粉末用0.5%的CMC-Na 配成所需浓度的受试药液。 　　1.2 动物Wistar大鼠（SPF级），6～8龄，实验开始时体质量为80～110 g,雌雄各半。由河南省实验动物中心提供。 　　1.3 仪器Pentra-60全自动血液细胞分析仪，法国ABX公司产品；UV-754紫外可见分光光度计，上海科学精密仪器有限公司产品；电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司制造。 　　1.4 生化试剂 尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、胆固醇（T-CHO）、血糖（GLU）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酐（CREA）、总胆红素（TBIL）等试剂盒，以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，批 　　2 方法［3，4］ 　　动物给药前预饲养1周，然后将动物随机分为4组，每组20只，雌雄各半，设空白对照组，冬凌草高剂量、中剂量和低剂量（40，20，10 mg/kg）组。给药各组灌胃容量为2 ml·(100 mg)-1,空白对照组给予等体积的0.5%CMC-Na，1次/d，连续12周。每日观察动物饮水、进食、行为活动等情况，称重1次/周，及时调整用药剂量。末次给药24 h,采集血样于全自动血球分析仪上检测红细胞数（RBC），白细胞数（WBC）、血红蛋白（HGB）、血小板计数（PLT）、淋巴细胞百分数（W-SCR），中性粒细胞百分数（W-LCR）。另取血样分离血清，用试剂盒测定血清血糖（GLU）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、胆固醇（T-CHO）、总胆红素（TBIL）等生化指标。解剖大鼠进行肉眼检查各器官情况，取心、肝、脾、肺、肾等称重并计算脏器指数。然后将上述器官用10%甲醛固定，进行病理学检查。 　　　3 结果 　　3.1 一般情况从给药开始至结束，各组大鼠外观正常、活泼、被毛光泽，眼、耳、鼻、口、生殖器无异常分泌物，大小便颜色形状均正常。各给药组动物也未见有系统毒性症状出现。无大鼠死亡。 　　3.2 体质量及摄食量在连续用药12周期间，冬凌草提取物高、中、低各剂量组及雌、雄动物的体质量变化、摄食量变化与对照组相比无显著差别(Pgt;0.05)，体质量变化见表1～2，实验中无大鼠死亡。表1 灌胃给予冬凌草提取物对雄性大鼠体质量的影响，表2 灌胃给予冬凌草对雌性大鼠体质量的影响（略）。 　　3.3 血液学检查 各剂量组各项血液学指标与对照组比较均无明显差异，凝血时间检查与对照组间无显著性差异(Pgt;0.05)。结果见表3。表3 冬凌草提取物对大鼠血液学指标的影响（略） 　　3.4 血液生化学检查 　　收集血液，分离血清，检查各项生化指标如下，胆固醇（T-CHO），尿素氮（BUN），血糖（GLU），总蛋白（TP），血清白蛋白含量（ALB），总胆红素（TBIL），碱性磷酸酶（ALP），血清天冬氨酸转移酶（AST），血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）。均无明显性差异（Pgt;0.05）。结果见表4。表4 冬凌草提取物对雌性大鼠血液生