冰片联合顺铂对大鼠C6胶质细胞瘤治疗作用.docVIP

冰片联合顺铂对大鼠C6胶质细胞瘤治疗作用 　【摘要】 探讨冰片联合顺铂对大鼠C6胶质细胞瘤的治疗作用。［方法］建立大鼠C6胶质瘤细胞模型，于治疗组给予灌服冰片及静脉注射顺铂，21天后分析治疗组与对照组胶质瘤横截面积。［结果］治疗组脑胶质瘤的横截面面积明显小于对照各组（Plt;0.05）。［结论］冰片能增加血脑屏障对顺铂的通透性，从而提高顺铂对胶质细胞瘤的治疗作用。 【关键词】 冰片；顺铂；大鼠C6胶质瘤细胞模型；血脑屏障 Abstract:［Objective］ To explore the treatment of rat cell line C6 brain glioma model with borneol and cisplatin.［Methods］ Prepare the rat cell line C6 brain glioma model，the treated group received oral borneo1 and intravenous infusion of Cisplatin ，the area of treated group and control groups were analyzed after 21 days. ［Results］ The mean area reduced significantly（Plt;0.05）compared with those of the control groups. ［Conclusion］ Borneol can enhance the permeability of blood—brain barrier to cisplatin，and increase the treatment of brain glioma with cisplatin. 　　Key words:borneol;cisplatin; rat cell line C6 brain glioma model; blood—brain barrier 　　顺式二氯二氨合铂(顺铂,Cisplatin ,DDP)是20世纪70年代上市的在临床上有高度抗癌活性的药物,对于脑癌、鼻咽癌、肺癌等均有良好疗效。血脑屏障(BBB)是一个介于血液和脑脊液之间、有选择性通过能力的动态界面，对于保持脑内环境的相对稳定具有十分重要作用。由于血脑屏障的保护作用,静脉注射的顺铂难以直接进入脑组织而发挥疗效。合成冰片是外消旋龙脑的混合物,同时也是常用的开窍药和佐使药,具有“芳香走窜、引药上行”之功效。研究发现，冰片有改善BBB通透性，促进其他物质透过BBB进入脑组织的作用，且能提高其他药物的血药浓度和生物利用度［12］。本实验研究中，我们旨在探讨应用冰片促进顺铂透过血脑屏障对大鼠C6胶质细胞瘤治疗的可行性，为研制新型抗脑肿瘤药物提供理论依据。 　　1 材料 　　1.1 细胞系和试剂 　　C6细胞株购于中科院上海细胞生物学研究所细胞库；医用顺铂，20mg/瓶，齐鲁制药；石蜡油，500ml/瓶，南昌白云制药；冰片，购于杭州胡庆余堂；250ml生理盐水5瓶，杭州民生药业；小牛血清购于杭州四季青胰蛋白酶及培养基购于GIBCO公司10％水合氯醛(自配)：以3ml/kg剂量腹腔注射麻醉大鼠； 　　1.2 仪器设备和器械 　　细胞培养系统：Thermo Scientific CRS自动化细胞培养系统；超净工作台：江苏苏净集团苏州安泰空气技术有限公司产；江湾I型大鼠脑立体定向仪：第二军医大学生产。 　　1.3 实验动物 　　40只雄性Wistar大鼠购于上海实验动物中心，体重300～320g。 　　2 方法 　　2.1 细胞培养 　　将C6细胞分装于数只75cm2(底面积)的培养瓶中。加入适量含有体积分数为10％小牛血清的RPMI1640培养液,置入温度37℃、CO25％的培养箱中培养。在细胞处于指数生长期时，以胰蛋白酶适量消化3～5min后，弃去消化液。用Hanks液吹打冲洗1～2次形成细胞悬液，调细胞浓度为每10μl含1.5×106个C6细胞的悬液用于接种。 　　2.2 颅内接种 　　将麻醉后的大鼠头部固定在脑立体定向仪上，剪去头顶部毛发，碘伏消毒后铺洞巾。取内眦连线与头部正中矢状面交点向后纵向切开头皮约1cm，分离暴露颅骨。根据Batker法确定右尾状核靶点，于冠状缝前1mm，中线右旁开3mm，以牙科钻在颅骨上钻孔，孔径约1.2mm，深达硬脑膜表面而不伤及脑组织。25μl微量注射器抽取C6细胞悬液10μl，沿骨孔缓慢匀速注射10min，注射完毕后留针5min，缓慢退针，骨孔用医用明胶海绵填充，骨蜡封闭。生理盐水冲洗手术区，无菌丝线缝合切口后消毒皮肤，术后加用青霉素抗感染，整个过程在层流超净台中进行，麻醉复苏