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几种免疫组化检测系统在免疫组化中应用 　 作者：江晓红 徐liming 许林杰 【摘要】 每种检测系统相对应的一抗稀释比都不相同，对使用即用型抗体的用户特别要注意，不能随意更换检测系统。而使用浓缩型抗体的用户，应该根据自己的经济条件，根据组织的来源、抗体表达的部位、抗体的强弱，选择一些敏感度较强的检测系统，同时必须根据检测系统的不同，选择不同的抗体的稀释比和处理方法，才能做出更完善的免疫组化结果。 【关键词】 免疫组化；病理诊断；检测系统 目前，免疫组化广泛地应用于病理诊断中，新的免疫组化检测系统也不断地被开发［1］。为了更好地使用好这些检测系统，我们把最常用的几种检测系统进行了比较。 　　1 材料 选择一抗分别来自DAKO公司的 CD30（BerH2）（1：30）；CD45RO（UCHL1）（1：100）；ER（1D5）（1：100）；CK（AE1/AE3）（1：100）；P53（DO7）（1：100）、中杉公司的CD30（BerH2）（1：30）；CD45RO（UCHL1）（1：100）；ER（1D5）（1：100）；CK（AE1/AE3）（1：100）；P53（DO7）（1：100）及迈新公司CD30（BerH2）（1：30）；CD45RO（UCHL1）（1：100）；ER（1D5）（1：100）；CK（AE1/AE3）（1：100）；P53（DO7）（1：100）。选择DAKO公司的EnvisonTM检测系统，高温抗原修复，染色步骤与时间完全按照产品说明书操作。 选择检测系统：DAKO公司的EnvisonTM检测系统，DAKO公司的Envison+R加强型检测系统，迈新公司的SP检测系统，迈新公司的EliVisionTMplus检测系统，中杉公司的PV6000检测系统，中杉公司的PV9000检测系统。一抗选择DAKO公司的CD30（BerH2）；CD45RO（UCHL1）；ER（1D5）；CK（AE1/AE3）；P53（DO7）。抗体稀释采用梯度稀释比的方法：CD30（1：15，1：30，1：60）、CD45RO（1：50，1：100，1：200）、CK（1：50，1：100，1：200）、ER（1：50，1：100，1：200）、P53（1：50，1：100，1：200）。 组织选择了乳腺癌（标记ER、P53）、肾癌（标记CK）、间变型淋巴瘤（标记CD30）和T细胞淋巴瘤（标记CD45RO）各5例，3μm连续切片。高温抗原修复，染色步骤与时间完全按照产品说明书操作。 镜下观察结果，每例切片取三个视野，每个视野数100个细胞，取平均值。阳性细胞数分别用4+（80%～100%）、3+（50%～79%）、2+（30%～49%）、+（5%～29%）、±（＜5%）表示。阳性强度分别用4+、3+、2+、+、±表示。背景分别用3+、2+、+、-表示。 　　　2 结果 　　2.1 不同公司的一抗与同一检测系统的检测结果 　　见表1。表1 不同公司的一抗与同一检测系统的检测结果（略） 　　2.2 不同公司检测系统和一抗的检测结果 　　一抗CD45RO（1：50，1：100，1：200）：S-P，EnvisonTM，Envison+R三个检测系统均表达一致，三个浓度阳性细胞依次（3+，3+，2+）阳性强度（3+，3+，2+），S-P检测系统背景（2+，+，-），EnvisonTM，和Envison+R检测系统背景（+，-，-），EliVisionTMplus和PV9000检测系统阳性细胞（3+，3+，3+），阳性强度（3+，4+，3+），背景（2+，+，-），PV6000检测系统阳性细胞（3+，2+，2+），阳性强度（2+，2+，+），背景（-，-，-）。 　　一抗CK（1：50，1：100，1：200）：S-P，EnvisonTM，Envison+R三个检测系统表达一致，三个浓度阳性细胞依次（3+，3+，2+）阳性强度（3+，3+，2+），S-P检测系统背景（2+，+，-），EnvisonTM，和Envison+R检测系统背景（+，-，-），EliVisionTMplus和PV9000检测系统阳性细胞（3+，3+，3+），阳性强度（4+，4+，3+），背景（2+，+，-），PV6000检测系统阳性细胞（3+，3+，2+），阳性强度（3+，2+，+），背景（+，-，-）。 一抗ER（1：50，1：100，1：200）：S-P，EnvisonTM，Envison+R三个检测系统表达一致，三个浓度阳性细胞依次（3+，3+，2+）阳性强度（3+，2+，+），S-P检测系统背景（2+，+，-），EnvisonTM检测系统背景（-，-，-）Envison+R检测系统背景（+，-，-），EliVisionTMpl