尾加压素Ⅱ对体外培养大鼠肾成纤维细胞促增殖作用.docVIP

尾加压素Ⅱ对体外培养大鼠肾成纤维细胞促增殖作用 　 作者：王丹 李才 李相军 齐玲 尹俐 高海成 【摘要】 目的 观察尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ，UⅡ)对大鼠肾间质成纤维细胞(RFB)的促增殖作用,探讨UⅡ在肾纤维化发生发展中的作用。方法 体外培养大鼠肾成纤维细胞并鉴定，采用MTT法、流式细胞仪(FCM)法分别观察不同浓度UⅡ作用下，大鼠肾成纤维细胞数、细胞周期的变化。结果 UⅡ可以促进RFB的增殖活性，随着UⅡ作用浓度的增加，MTT吸光度值呈先升高后降低的趋势，其中1×10-9和1×10-8mol/L UⅡ组作用显著(P＜0.05)；在1×10-10，1×10-9，1×10-8，1×10-7mol/L UⅡ作用下，RFB S 期细胞百分率均较对照组明显增加，而G0G1期细胞百分率均较对照组明显降低(P＜0.01)；在1×10-7mol/L UⅡ作用下,上述各参数与对照组比较无统计学意义(P＞0.05)。结论 UⅡ能促进大鼠肾成纤维细胞增殖，影响细胞周期，这可能提示UⅡ在肾纤维化发生和发展过程中发挥着重要作用。 【关键词】 尾加压素Ⅱ；成纤维细胞；增殖 【Abstract】Objective To observe the effects of urotensinⅡ(UⅡ) on the proliferation of the renal interstitial fibroblasts(RFB) of rats and explore the role of UⅡ in the renal interstitial fibrosis. Methods RFB from Wistar rats were isolated and cultured. Cell number was observed by MTT assay. Cell cycle was evaluated by flow cytometry (FCM).Results With the increase of urotensin Ⅱ concentration, the optical density at 490 nm of RFB as shown by MTT assay was first increased but then decreased, and remained at a significantly higher level in the cells treated with 1×10-9 or 1×10-8 mol/L UⅡ compared with those in control group(P＜0.05). With the treatment of 1×10-10，1×10-9，1×10-8，1×10-7 mol/L UⅡ, the S phase cell percentage were significantly higher, and the G0G1 phase cell percentage was significantly lower than those in control group(P＜0.01，P＜0.05), but the indices in 10-7 mol/L UⅡ group were not significantly different from those of control (P＞0.05).Conclusions UⅡ can directly induce RFB proliferation and affect the cell cycle, which suggests the crucial role of UⅡ in the renal interstitial fibrosis. 【Key words】Urotensin Ⅱ; Renal interstitial fibroblasts; Proliferation 　　尾加压素Ⅱ(Urotensin Ⅱ，UⅡ)是一种生长抑素样环肽，最早从硬骨鱼脊髓尾部下垂体中分离而来，缩血管效应是内皮素1(ET1)的10倍多〔1〕。近年国内外的研究相继发现UⅡ并非仅有血流动力学作用，其在肾脏的高表达有可能有重要的意义〔2〕。目前UⅡ对肾间质纤维化的作用研究尚未见报道。本研究观察了UⅡ对大鼠肾成纤维细胞增殖、细胞周期的影响，旨在探讨UⅡ在肾间质纤维化中可能发生的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 主要试剂 　　体重100 g Wistar大鼠由吉林大学实验动物中心提供，DMEM培养基(Gibco)，标准胎牛血清(天津灏洋生物技术有限公司)，Urotensin(UⅡ)(Sigma)，免疫组织化学SABC试剂盒和