实时生物分子相互作用分析技术用于链霉亲和素-生物素化抗体的层层.PDFVIP

V o l. 23 高 等 学 校 化 学 学 报 　　N o. 2　 2 0 0 2 年 2 月 　　 　　　　　CH EM ICAL JOU RNAL O F CH IN E SE UN IV ER S IT IE S　　　　　　　　　 195～ 198　 实时生物分子相互作用分析技术用于 链霉亲和素- 生物素化抗体的层层组装研究 裴仁军　崔小强　杨秀荣　汪尔康 ( 中国科学院长春应用化学研究所电分析化学开放研究实验室, 长春 130022) 摘要　使用生物分子相互作用分析(B iom o lecu lar in teract ion an a ly sis, B IA ) 技术实时监测了在链霉亲和素表 面层层组装亲和素生物素化抗体多层膜的过程, 结果表明, 通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用, 能够在表面形成均一的多层膜, 并用实时B IA 技术求得了每层蛋白质的表面浓度. 对于生物素化抗体, 单 2 2 层吸附表面浓度为 132 ; 对于链霉亲和素, 单层吸附表面浓度为 2 93 . 同时对蛋白质在表 ng mm ng mm 面的排列状态进行了探讨. 关键词　表面等离子体子共振; 实时B IA ; 层层组装; 链霉亲和素; 生物素化抗体 中图分类号　 657　　　　文献标识码　 　　　　文章编号　025 10790 (2002) 020 19504 O A 近年来, 含有生物分子的特定超薄膜的组装已成为一个新的研究热点, 其研究将会极大地促进生 [ 1～ 3 ] 物传感器、生物电子、生物膜和人工器官等领域的研究进展 . 链霉亲和素生物素之间因其强的亲 和力( = 1015 ) 被广泛用于许多领域, 通过链霉亲和素生物素层层组装的技术可实现对酶固定 K A m o l L [4 ] [ 5 ] 的精确控制 以及生物分子超薄膜的制备 . 用这种方法制得的多层膜极其稳定, 不易受溶液pH 值 [ 6 ] 等环境条件的影响, 因而比常用的静电吸附的方法 制得的多层膜更有优越性, 而且静电吸附的方法 局限于两种带不同电荷的物质之间的组装. 常用来表征多层膜的手段, 如X 射线反射光谱、紫外可见 光谱、傅里叶变换红外光谱、椭圆偏振光谱以及原子力显微镜等,