AFLP标记在生物种质资源研究中的应用.PDF

第 14 卷　第 4 期　　　　　　　　　世　界　林　业　研　究　　　　　　　　V o l. 14　N o. 4 200 1 年 8 月　　　　　　　　　 　W o r ld Fo re st ry R e search　　 　　　　　　　A u g. 200 1 专题论述 A FL P 标记在生物种质资源研究中的应用 1 1 2 李　斌 　顾万春 　陈晓阳 ( 1 中国林业科学研究院, 北京 10009 1; 2 北京林业大学, 北京 100083) 摘要　综述了A FL P 在生物种质鉴定、亲缘关系鉴别、遗传多样性评价、高密度 遗传图谱构建等研究中的应用, 提出了当前生物种质资源保存与利用研究中存 在的问题及解决途径。 关键词　A FL P　生物种质资源　遗传多样性　种质鉴定　高密度遗传图谱 ( ) 生物种质资源, 是以物种为单元的遗传多样性资源, 是种内基因、基因 组 型集群构 ( ) 建的遗传多样性载体。种质资源不等同于品种资源, 品种资源 优良家系, 优良无性系等 [ 1 ] 仅是种质资源的一部分 。生物种质资源研究已经历了3 个阶段。第 1 阶段, 即二战以前, [2 ] 处于朦胧阶段, 主要研究生物种质资源的地理分类、起源进化等问题 ; 第 2 阶段, 即二战 后至 20 世纪 90 年代前, 为收集保存阶段, 由于面临种质资源的大量流失等严峻问题, 各 [2 ] 国加强了对生物种质的收集与保存, 被保存的种质约450 万份 ; 第 3 阶段, 即20 世纪 90 年代至今, 为科学保存与评价利用阶段, 在这一阶段包括A FL P 在内的DN A 分子标记开 始应用于生物种质资源的研究, 大大提高了生物种质资源研究的效率。 ( ) A FL P A m p lif ied F ragm en t L en g th Po lym o rp h ism , 扩增片断长度多态性 分子标 记技术是 1992 年由Zab eau 和V o s 等人在RA PD 和R FL P 基础上发明的一项DN A 分 子标记技术。 标记技术在植物遗传育种、动物遗传育种等领域应用研究的综述报道 DN A 较多[3～ 5 ] , 但关于分子标记在生物种质资源研究中应用的综述尚未见报道。 1　A FL P 原理、技术关键与优化措施 A FL P 标记技术的原理即将RA PD 的随机性和R FL P 的专一性巧妙结合, 通过选用 不同的内切酶以达到选择性扩增 目标, 故又称为选择性限制片断扩增标记(Select ive R e st r ict ion F ragm en t A m p lif icat ion , 简称 SR FA ) 。由于不同材料的DN A 的酶切片断存在 差异, 因而便产生了扩增产物的多态性。 A FL P 操作要求较高的技术, 掌握其关键技术并进一步优化, 不但能提高工作效率, 还可降低成本。经过多人反复实践总结认为,A FL P 标记技术应用中需注意的主要技术关 键及优化措施如下[4, 5 ] : 收稿 日期: 200 1- 04- 25