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微生物一、微生物的探究历程1、荷兰人列文.虎克：显微镜的发明者，1674年观察发现了杆菌、球菌和原生动物，他称为“小动物”，并向英国皇家学会写信介绍自己的发现，首次揭示了一个崭新的微生物世界。2、巴斯德（法国，近代微生物的奠基人，微生物学家）（１）否定“自然发生说”……“生生说”（曲颈瓶实验）：?将营养液(如肉汤)装入带有弯曲细管的瓶中，弯管是开口的。巴斯德将瓶中液体煮沸，使肉汤中的微生物全被杀死，然后放冷静置，结果瓶中不发生微生物。空气可无阻地进入瓶中，而空气中的微生物则被阻而沉积于弯管底部，不能进入瓶中。（２）巴氏消毒法（62度，30分钟）： 用于牛奶、奶酪、啤酒（３）发明了炭疽病疫苗和狂犬病疫苗3、科赫：1843-1910年德国细菌学家：?1876年，科赫发明了固体培养基，将微生物样品稀释后，用针尖沾取少量的稀释菌液在固体培养基上划线，不久培养基的表面就会长出多种菌落。他用实验证实了“生生论”?1882年发现并分离出了引起肺结核的病原菌和结核分支杆菌； ?1905年，科赫因结核杆菌的研究成果而获诺贝尔生理学及医学奖。二、微生物的种类1、古细菌：生活在极端环境下细胞壁组成和真细菌不同青霉素不能抑制细胞壁的形成对抗生素利富平不敏感。（利富平抑制细菌RNA的合成）2、真细菌（１）结构细胞壁：和植物细胞壁成分（纤维素和果胶）不同，为肽聚糖　　细胞质：只有核糖体这一种细胞器，还存在质粒（小型环状DNA分子，基因工程目的基因的运载体）细胞膜：拟核：分布DNA（２）芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。（３）绝大多数属于分解者，也有属于生产者（蓝细菌、光合细菌、硝化细菌）。3、真菌（酵母――单细胞，出芽或孢子生殖。霉菌――青霉、根霉、曲霉。蕈（xun）――蘑菇、香菇、平菇、金针菇）真核4、原生生物（单细胞藻类、原生动物――几乎都是单细胞生物，如草履虫、变形虫，它们是水域的主要浮游动物。粘菌――介于原生动物和真菌之间的一种真核生物）5、病毒微生物特点：个体微小（微米或纳米）、结构简单、分布广、营养方式多样、生长繁殖快三、微生物的营养1、五大营养物质：碳源、氮源、无机盐、生长因子、水2、培养基配置的基本原则：?目的明确。?营养要协调。 牛肉膏：蛋白胨：Nacl=1：2：1?物化条件要适宜。如pH、渗透压等。（１）选择适宜的营养物质：选择培养基功能：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某些物理、化学因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。常用的异养型细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；常用的自养型细菌培养基是无机的合成培养基；常用的酵母菌培养基为麦芽汁培养基?方法1：采用“投其所好”的策略。加富的物质是特殊的碳源和氮源。不加氮源的无氮培养基：分离出自生固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离出自养型微生物以纤维素为唯一碳源的培养基可用于分离纤维素分解菌；用石蜡油来富集分解石油的微生物；用较浓的糖液来富集酵母菌等；?方法2：“取其所抗”。利用待分离的微生物对某些物理和化学因素具有抗性而设计的如分离放线菌时，在培养基中加入数滴10％的苯酚，可以抑制霉菌和细菌的生长；在分离酵母菌和霉菌的培养基中，添加青霉素、四环素和链霉素等抗生素可以抑制细菌和放线菌的生长；7.5％NaCl可以抑制大多数细菌，但不抑制葡萄球菌，从而选择培养葡萄球菌；鉴别培养基：培养基中加入伊红、美蓝大肠杆菌菌落出现金属光泽的紫黑色。（２）严格灭菌：条件：1.05kg/cm2 121度 15——30分钟目的：杀死细菌芽孢（３）培养基配置的实验：称量按照比例，牛肉膏（天然物质，含有生长因子）用烧杯溶解自来水（存在微量元素）定容　　（分别溶解再混合加热，最后加琼脂）加热至沸腾后，加入剪断的琼脂1%加热至琼脂融化（玻璃棒搅拌，防止琼脂沉淀在杯底）热水定容：（第二次定容的目的：加热过程中有部分水分散失用热水定容的目的：防止融化的琼脂凝固）调解PH值 7.2——7.4高压蒸汽灭菌冷却到50度倒平板（超净工作台，酒精灯火焰烧瓶口）四、微生物实验1、微生物接种：防止杂菌污染：超静工作台操作、灼烧接种环、试管口在酒精灯火焰上桌少，在火焰旁接种接种方法：平板划线法：用于微生物的培养，观察菌落目的：使接种物逐渐稀释，出现单个微生物，培养后出现单个菌落划线法的注意点：1、每次划线前要灼烧 2、冷却后从上一区划线的末端开始划