蛋白质与酶工程及应用技术理论课教学大纲-邓辉.doc

教 学 大 纲 JIAOXUEDAGANG 蛋白质与酶工程 —及应用技术 皖西学院生物与制药工程学院 现代生物学教研室 邓辉 2011年7月 编 写 说 明 蛋白质与酶工程是将酶学理论与工程技术相结合，研究酶的研发改造、生产应用的一门新兴学科。在研究内容、手段和目的上与基因工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程等孪生学科是相互交融的整体 课时分配表 章节 名称 课时数 第1章 绪论 4 第2章 酶的分离工程 8 第3章 固定化酶与固定化细胞 5 第4章 化学酶工程 5 第5章 酶的非水相催化 4 第6章 生物酶工程 6 第7章 酶反应器 6 第8章 研究的方向、进展和热点 1 合计 40 第一章 绪论 【教学目的与要求】通过本章的学习使学生了解和掌握蛋白质与酶工程的定义、特点及蛋白质与酶工程的应用。了解蛋白质与酶工程的发展史及发展前景。 【教学重点与难点】蛋白质与酶工程、催化剂的定义、特点；生物反应过程的特点及组成部分；蛋白质与酶工程的应用。 【教学方法】讲授与CAI课件、幻灯胶片等直观教学手段相结合。 【教学时数】4学时 【教学内容】 第一节蛋白质与酶工程的定义和特点 （一）定义 酶工程从应用目的出发研究酶，在一定的生物反应装置中利用酶的催化性质，将相应原料转化成有用的物质。是酶学和工程学相互渗透结合形成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学。 蛋白质工程是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的，以结构生物学与生物信息学为基础，以基因重组技术为主要手段，对天然蛋白质分子的设计和改造。 分子酶学工程是酶工程在分子水平上的体现，既不同于酶工程，也不能简单地理解为蛋白质工程在酶学方面的应用。 技术支柱是化学工程、基因工程、蛋白质工程（包括分子进化）和酶工程 重点:酶工程研究方法;热点;定义。 （二）、蛋白质与酶工程的特点： 1、生物技术的多学科性 2、生物催化剂的特性 ⑴生物催化剂的定义：是游离或固定化的细胞或酶的总称。重点 ⑵生物催化剂的种类： 优点： 具有能使反应物在常温、常压下反应； 反应速率大 催化作用专一 缺点： 1）易受热、受某些化学物质及杂菌的破坏而失活； 2）稳定性差； 3）温度、pH等参数对反应相当敏感； 4）活细胞还存在着个体差异、遗传性变异等生物学特有的问题，对营养、微量元素、渗透压等也有一定的要求。 第二节蛋白质与酶工程的发展简史 第三节蛋白质与酶工程的应用 （一）食品工业中的应用 （二）在医药工业中的应用 (三）在饲料、轻纺、化工、环保领域的应用 (四）分析试剂 （五）开发新能源 导入新课：发放往届学生期末考试试卷，摸底知识基础，促发兴趣。 承前启后：酶的特点 【思考题】 1.生物催化剂有何特点，与化学催化剂比较有何优缺点？ 2.为何称蛋白质与酶工程是多学科性、综合性的科学技术？ 3.蛋白质与酶工程的研究内容与方法？ 4.蛋白质与酶工程主要应用在那些领域？ 5.蛋白质与酶工程的发展趋势。 6. 蛋白质与酶工程的发展经历了哪几个阶段?各有何特点? 【教学效果追记】 追溯历史，重走科学发展历程。学习科学思维方法。 课堂提问承先启后的问题，激发对本课程的兴趣，同时活跃课堂气氛。 【预习】酶的发酵工程 第二章 酶的分离工程 【教学目的与要求】能根据待分离酶的性质、成本等确定分离工艺流程；掌握酶分离纯化的一般原则、方法及其原理；掌握酶纯度的检验方法。 【教学重点与难点】亲和层析的原理、方法；SDS原理、方法；膜分离的种类、原理及应用。 【教学方法】讲授与CAI课件、幻灯胶片等直观教学手段相结合。 【教学时数】5学时 【教学内容】 酶分离纯化的一般原则 一、酶分离纯化方法的选择:目前酶的分离纯化方法都是根据酶与杂蛋白的性质差异而建立的。在选择分离纯化方法时，要考虑以下几个方面：首先对待纯化的酶的理化性质有比较全面的了解；以酶活力和比活力为标准，判断所选择的方法是否得当；严格控制操作条件，防止酶的变性失活。 二、建立一个可靠和快速的测活方法酶的活力单位（U，activity unit） 酶单位，国际单位 IU ，Kat单位。 Kat与IU的换算关系如下： 1Kat=60×106IU 1IU=1μKat/60= 16.7nKat .酶的比活力specific activity：每mg蛋白质所含的酶活力单位数表示，对同一种酶来说，比活力愈大，表示酶的纯度愈高。 比活力=活力U/mg蛋白=总活力U/总蛋白mg 三、酶活力的测定方法 分光光度法spectrophotometry 酶偶联分析法enzyme coupling assay 荧光法fluorometry 同位素测定法isotope method 电化学法electrochemical method pH