2017高考生物考前冲刺复习-第1部分-专题突破方略-专题十五-生物技术实践讲义.docVIP

专题十五 生物技术实践 　1.微生物的分离和培养　2.培养基对微生物的选择作用　3.某种微生物数量的测定　4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用　5.从生物材料中提取某些特定的成分　6.运用发酵加工食品的基本方法 1．关于微生物培养及传统发酵技术的3个误区(1)误认为微生物培养基中都需有机碳源、氮源。自养微生物培养不需有机碳源固氮菌的培养基中2)误认为泡菜制作过程中乳酸和亚硝酸盐的含量都是先增加后减少。泡菜制作过程中乳酸含量是先增加后保持稳定。(3)误认为果酒、果醋制作过程中都需要无氧条件。果醋制作过程中利用醋酸菌的有氧呼吸因此需要有氧条件。关于某种微生物数量测定时应注意的问题用稀释涂布平板法计数微生物时要求选择菌落数在～300 的平板进行计数。解题时易出现以下误解：(1)只得到130～300的平板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原则易受到偶发因素的影响。(2)得到3个或3个以上菌落数在30～300的平板也不一定正确这可能有两种情况：不同平板间差异较大如得到3个平板菌落数分别为230、34、240虽然菌落数均在“30～300”之间这也是不正确的因为“34”与“230”“240”差异太大应重新实验找出原因。不同平板之间差异不大是符合要求的用其平均值作为关于三种生物有效成分提取的2个误区(1)误认为水蒸气蒸馏原理相同三种蒸馏方法的原料放置位置相同。三种蒸馏方法原料放置位置不同且蒸馏要适当延长蒸馏时间温度不能太高。(2)误认为萃取效果与原料处理无关。一般原料颗粒小萃取温度高时间长需提取的物质就易充分溶解萃取效果更好。考点一　微生物的培养、分离和数量测定与传统发酵技术[学生用书P81] 　(2016·高考全国卷丙)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列1)分离纯化乳酸菌时首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释进行梯度稀释的理由是_____________________________________________________________。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时菌液中常需要加入一定量的__________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。【解析】　(1)分离纯化乳酸菌过程中需要在固体培养基上培养乳酸菌并得到单菌落。由于泡菜滤液中菌的浓度高直接培养很难分离得到单菌落故分离纯化乳酸2)由于乳酸菌代谢产生的乳酸可以溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈故培养基中加入碳酸钙可用于鉴别乳酸菌同时碳酸钙也可以中和乳酸菌产生的乳酸。(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时菌液中需要加入一定量的甘油加甘油是为了避免水结冰产生冰晶损伤细胞。【答案】　(1)无菌水　泡菜滤液中菌的浓度高直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌　中和产生的乳酸3)甘油 1．微生物的培养和分离(1)纤维素酶的成分及其作用纤维素纤维二糖葡萄糖(2)选择微生物接种方法的原则纯化微生物：平板划线法和稀释涂布平板法均可。计数微生物：只能选择稀释涂布平板法。(3)筛选微生物的2种选择培养基以尿素为唯一氮源的培养基：选择培养分解尿素的细菌。富含纤维素的培养基：选择培养纤维素分解菌。(4)鉴别微生物的两种鉴别培养基添加酚红指示剂的培养基：分解尿素的细菌可使该培养基变红。含有纤维素、刚果红的培养微生物数量的测定(1)显微镜直接计数法原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。方法：用计数板计数。缺点：不能区分死菌与活菌。(2)间接计数法(活菌计数法)原理：当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌通过统计平板上的菌落数C÷V)×M，其中代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)代表稀释倍数。操作：设置重复组增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。传统发酵技术的应用(1)发酵类型及发酵条件的控制果酒制作和泡菜制作：无氧发酵应控制无氧条件。果醋制作和腐乳(2)发酵菌种类型果酒制作和腐乳制作发酵菌种：真菌。果醋制作和泡菜制作发酵菌种：细菌。(3)控制杂菌的4大措施通过发酵条件控制杂菌。无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。乳酸发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。利用香辛料(调味料)控制杂菌：如腐乳、泡菜的制作。　考查微生物的