HL-60细胞培养上清液对人脐带血单个核细胞增殖分化影响.pdfVIP

遵义医学院硕士学位论文 111御细胞培养上清液对人脐带血单个核细胞增殖分化的影响 -●上-Jk 刖 吾 白血病是威胁人们生命健康最常见的恶性肿瘤之一。目前治疗白血病最有效 stem 的方法是造血干细胞(hematopoieticcell，HSC)移植。脐血作为骨髓，外周 血后的第三种HSC的来源，越来越受到人们的重视，已成为临床骨髓移植的一种主 要替代资源，然而，由于收集的脐带血有限，有核细胞(nucleatedcell，NC)很难达 到≥107／kg体重(受者)，也就限制了脐带血HSC移植在成人中的应用。 一般认为，对于处于完全缓解期的急性白血病和慢性期的慢性髓性白血病患 者，只要输入脐带血NC≥107／kg体重，其疗效是令人鼓舞的。所以如何增加输入的 脐带血NC数是提高成人脐带血移植成功的关键之一。脐带血移植前，通过体外扩 增其NC数是解决这一难题的有效途径。 目前有关脐带血NC的体外扩增的报导不多，多数的研究集中于脐带血干／祖细 cell 胞的体外扩增。裴雪涛等人【I】发现，体外实验中干细胞生长因子(stem (granulocytec010ny—stimulating 扩增人脐带血单个核细胞(mononulearcells删C。)中的CD34+细胞。其他学者也证 kimses 明FLT一3配基(type-3tyrosine receptor 脐带血MNC。中CD34+细胞有明显的增殖效果【2，3】。 已有研究证明，白血病细胞能够以自分泌方式分泌许多生长因子。Young等人 川发现急性原始粒细胞性白血病(acutemyeloblasticleukemia，AML)能够分泌粒 细胞一巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte—macrophagecolonystimulating endothelial 报导HL-60细胞能分泌血管内皮生长因子(vasculargrowth N-terminal 氨基末端激酶(C-Jun kinase，JAK)激活信号转导因子和转录激活因子 用，并可诱导CD8+T细胞调亡【8】。这些研究结果提示，HL-60细胞除了可分泌促进 细胞增殖的生物活性物质外，也可产生对某些细胞起抑制作用的因子。HL-60细胞 培养上清液对人脐带血NC的增殖效应，以及对脐带血HSC分化表型的影响，目前 4 一 遵义嚣学院磺主兰竺兰奎!鎏避窭鎏苎茎圭鎏矍墅查茎兰垒苎尘鍪塑墼望蔓坌垡墼墅堕 尚无相关报道。 本研究的目的是探讨HL-60细胞培养上清液对人脐带血MNCs的增殖作用及其 分讫表型的影响，以寻求脐带盎隧体外扩增懿新资源、薪途径。 5 遵义医学院颧圭学笾论文HL-60纲夔培养一秘舞滚对入菠豢盘摹令核纲蕤壤殪分豫懿影啧 1材料与方法 1．{封卜∞细胞株耩卜60细胞源自入骨髓细胞的自盎病细胞，购子中国科学院细 胞库通过常规传代，冻存保护。 1．2脐带血的来源经知情同意后，无菌采集足月分娩脐血3例(肝素抗凝)， 每份5黼l，采集后2小时内进入实验程序。 1．3主要试剂本试验所用主要试剂见表1 表1主要试剂 Tab．1}lain