生物分离工程 贾凌云 膜分离3.pptVIP

膜的分离操作 超-微滤的工作模式可分为浓缩、透析和纯化三种。 1、浓缩 主要用于以菌体或蛋白质浓缩为目的的膜分离。 在浓缩悬浮粒子或大分子的过程中，产物被截留 在料液罐中。 在分批浓缩中，浓缩物的最终体积Vc，可由其 初始体积V0和透过体积Vf之间的质量平衡来确定。 Vc = V0 – Vf 体积浓缩系数CF 例1， 有浓度为2%的蛋白质溶液，欲使蛋白质分 别浓缩至4%、10%和20%，计算不同截留率情况 下蛋白质的收率。 例2，浓缩1000dm3浓度为2%的蛋白质溶液，所 用膜组件对蛋白质的截留率为1，透过流量为Q （dm3/h）= 500ln( ), , 计算浓缩不 同程度所需的时间。 根据公式： 根据浓差极化模型，在完全截留的情况下， 透过液的流量可用下式表示： 存在如下方程： 将各种参数带入上式，得到浓缩倍数与时间 的关系见下表： 2、洗滤或透析： 在悬浮粒子或大分子的透析过滤中， 产物被膜截留住，低相对分子量溶质 （盐、蔗糖和醇）则通过膜。主要以 除去菌体或高分子溶液中的小分子溶 质为目的。 透析过程中向原料罐中连续加入水或缓冲液， 若保持料液量和透过通量不变，则目标产物和小 分子溶质的物料衡算式为： — 小分子溶质的初始浓度； — 透析后的小分子溶质浓度； — 料液体积； —流加水或缓冲液的体积（透过液体积）； Rs — 小分子溶质的截留率 例3，例2中的蛋白质溶液中盐浓度为1%，选用的 膜组件完全透过盐。其它条件同例2。欲使蛋白 质浓缩至20%，透析使盐浓度降至0.01%，计算 浓缩不同程度后所需的洗滤时间。 浓缩不同程度后所需的洗滤时间。 3、纯化：采用这一工作模式纯化不同分子量的 蛋白质，分子量较小的溶质进入透过液 中，分子量较大的物质被截留。产物在 纯化过程中的总回收率R为： 和 分别为透过液和初始浓缩液体积。 中空纤维膜的工作模式 中空纤维膜的工作模式分为超滤、再循环、 逆洗。 超-微滤系统的操作方式： 1，开路循环 2，闭路循环 3，连续操作 膜技术的应用 膜分离法在生物产物的回收和纯化方面的应用可归纳为 以下几个方面： （1）细胞培养基的除菌； （2）发酵或培养液中细胞的收集或除去； （3）细胞破碎后碎片的除去； (4) 目标产物部分纯化后的浓缩或洗滤除去小分子溶质； (5) 最终产品的浓缩和洗滤除盐； (6) 制备用于调制生物产品和清洗产品容器的无热原水。 1，菌体分离 利用微滤或超滤操作进行菌体的错流过滤分离是膜 分离法的重要应用之一。与传统的滤饼过滤和硅藻土过 滤相比，错流过滤法具有如下优点： (1)透过通量大； (2)滤液清净，菌体回收率高； (3)不添加助滤剂或絮凝剂，回收的菌体纯净，．有利于进一步分离操作(如菌体破碎，胞内产物的回收等)； (4)适于大规模连续操作。 (5)易于进行无菌操作，防止杂菌污染。 但如前所述，膜分离的最大问题是膜污染引起的透 过通量大幅度下降。如合理地解决膜污染和清洗问题， 保持较高的透过通量，错流过滤将会替代传统的过滤技 术和离心分离技术，成为菌体分离的重要手段。 2 小分子生物产物的回收 氨基酸、抗生素、有机酸和动物疫苗等发酵产品的 相对分子质量在2000以下，因此选用MWCO为l×104一 3×104的超滤膜，可从发酵液中回收这些小分子发酵产物， 然后利用反渗透法进行浓缩和除去相对分子质量更小的 杂质。 此外，抗生素等发酵产物中常含有超过药检允许量 的致热原(pyrogen)，直接使用会引起恒温动物的体温升 高，制成药剂前需进行除热原处理。热原一般由细菌细 胞壁产生，主要成分是脂多糖、脂蛋白等，相对分子质 量较大。如果产品的相对分子质量在1000以下，使用 MWCO为l×104的超滤膜可有效地除去热原，并且不影响产 品的回收率。 3 蛋白质的回收、浓缩与纯化 胞外的蛋白质产物在微滤除菌的同时即可从滤液中 回收，由于滤液清净，对进一步的分离纯化操作非常有 利。蛋白质