RNA复制子--疫苗.pptVIP

RNA复制子疫苗 RNA复制子疫苗 产生背景 作用原理 主要载体 基本特点 RNA复制子疫苗的产生背景 基因工程疫苗：不具感染力，激活免疫的能力差。2O世纪90年代初发展起来的DNA疫苗在一定程度上可解决细胞免疫低下的问题。 DNA疫苗：外源DNA与宿主细胞基因组发生整合，造成恶性转变的潜在危险；由于需要长时间低水平表达外来抗原，有诱发自身免疫反应的可能，如诱发DNA抗体；在灵长类动物体内实验结果并不很理想，所需剂量大，免疫原性低。 为解决DNA疫苗存在的问题，另外一种可行的替代办法就是RNA疫苗 作用原理 RNA复制子疫苗，利用源自病毒的能够自主复制的RNA，其结构蛋白基因由外源抗原基因取代，保留了非结构蛋白(RNA复制酶)基因。而外源基因由亚基因组mRNA启动子控制表达。 表达抗原的RNA复制子可以3种形式递送至体内：①构建成质粒DNA，注人体细胞，由细胞RNA聚合酶Ⅱ体内转录成复制子RNA；②将RNA复子载体进行体外转录，得到裸RNA，再将其注入体细胞；③将复制子RNA包装入病毒样颗粒 作用原理 RNA复制子在宿主细胞中利用细胞内的表达系统表达RNA复制酶，RNA复制酶可使RNA复制子高效地复制，并在细胞内产生大量外源抗原基因的mRNA，使外源抗原基因得到高效表达，以诱导细胞免疫和体液免疫应答 同时RNA复制子的大量复制可导致感染细胞的凋亡，宿主细胞的凋亡有利于免疫系统识别外源抗原。 RNA复制子载体 用作RNA复制子载体有披膜病毒科的甲病毒、黄病毒、小RNA病毒、杯状病毒及副粘病毒等 目前已对一些疾病模型基于复制子的治疗性和预防性疫苗进行了研究。涉及的对象包括病毒、肿瘤及细菌毒素等。 RNA复制子疫苗特点 优点：抗原表达效率高；安全性好；免疫效果好； 用途广 缺点：稳定性差；可能会引起宿主周围细胞凋亡，大 量细胞凋亡可能造成炎症反应 抗原表达效率高 RNA复制酶使得RNA得到高水平复制，同时抗原基因也得到高效表达。理论上，在单细胞中4 h内有近2×105拷贝的RNA产生，抗原的表达可达总细胞蛋白的25％，因此其用量远远低于常规DNA质粒就能诱导很强的免疫应答。有报道显示，纳克水平的自主复制基因疫苗就能引发有效的抗体和CTL细胞反应。 安全性好 RNA复制子疫苗的表达短暂，且不会造成转化。RNA 复制于细胞浆内，排除了核的参与， 而且由于宿主细胞缺乏内源性的反转录酶，不可能反转录为DNA整合到宿主基因组。另外，RNA复制子导致转染细胞的溶解，避免了有复制能力病毒的产生。因此，RNA复制子疫苗在安全性方面拥有普通DNA疫苗无可比拟的优越性。 免疫效果好 RNA复制子疫苗可同时诱导全身免疫和黏膜免疫、抗体应答和CTL反应；另外，复制子系统能自主复制，但不能自行包装为感染性病毒颗粒，可针对多种病原进行连续免疫，而不受已有载体病毒抗体的干扰。 用途广 RNA复制子疫苗可用于防治传染病、肿瘤等多种疾病 稳定性差 裸RNA容易降解，不易保存和运输。将RNA包装成病毒样颗粒，或利用其他方法(如脂质体)将RNA包裹起来能提高其稳定性 自主复制的RNA疫苗可能会引起宿主周围细胞凋亡，大量细胞凋亡可能造成炎症反应。