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放线菌（Actinomycetes） 细菌 真菌 单细胞 多数腐生 少数寄生 中性或偏碱性土壤 放线菌对人类的主要贡献——产抗生素 4000多种抗生素 链霉素 土霉素 金霉素 卡那霉素 井岗霉素 肺结核 水稻纹枯病 肠道感染 角膜炎 次级代谢产物 初级代谢产物 抗生素，色素，蛋白抑制剂，免疫调节剂等 乙醇，有机酸，氨基酸等 真核微生物 真核微生物 真菌 显微藻类 原生动物 酵母菌 丝状真菌（霉菌） 担子菌 酵母菌 糖酵解 ——酒精 CO2 ——面包等 单细胞蛋白 脱蜡 菌体（核酸，维生素） 基因工程宿主菌 直径： 2-5 ?m 用途 湿润、较光滑，有一定的透明度，容易挑起， 菌落质地均匀 大多呈乳白色，少数红色 菌落比起细菌显得较大而厚 酵母菌的 菌落特征 常见的酵母菌 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae） 啤酒，果酒，酒精发酵，面包 热带假丝酵母（Candida tropicalis) 单细胞蛋白 异常汉逊氏酵母（Hansenula anomala) 乙酸乙酯 巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris) 基因工程菌 目前已知有1000多种酵母 霉菌菌丝 霉菌与其它菌比较 与酵母菌比 细胞壁： 含几丁质 菌丝体 与放线菌比 菌丝：基内菌丝 气生菌丝 分子孢子梗 菌丝：大多是多细胞，有隔膜 细胞结构 四种典型的霉菌 根霉 毛霉 曲霉 青霉 特征 菌种的选育 现代选育方式…… §6-3 发酵工艺 种子培养 发酵过程形式 发酵培养基优化 发酵过程控制 发酵的基本过程 发酵过程形式 批式发酵 补料发酵→带放（半连续发酵） 连续发酵→多级连续发酵 发酵-分离耦合 …… 连续发酵 连续发酵是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基，同时以相同速度流出培养液，从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。 优点 ① 可提高设备利用率和产量； ② 发酵中各参数趋于恒值，便于自动控制； ③ 易于分期控制。可以在不同的罐中控制不同的条件。 缺点 ① 对设备的合理性和加料设备的精确性要求甚高； ② 营养成分的利用较分批发酵差，产物浓度比分批发酵低； ③ 杂菌污染的机会较多，菌种易因变异而发生退化。 培养基优化 碳源、氮源、微量元素、诱导因子等 发酵过程控制 温度 pH 通气 搅拌 §6-4 生物下游工程 预处理与固液分离 初步纯化（提取） 高度纯化（精制） 成品化及废液处理 动物细胞体外培养和核移植 胚胎或幼龄组织 ↓胰蛋白酶分解弹性纤维 单个细胞 ↓加培养液 细胞悬浮液 ↓ 10代细胞 ↓ 50代细胞 ↓ 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 现代细胞工程 细胞壁的去除、核移植的尝试——童第周 细胞融合 细胞融合中的明星：杂交瘤技术（Kohler） …… （1975发明，1984，1995二度诺贝尔奖 1997年，多利羊证明体细胞的遗传全能性 …… 2010年，人工合成生命 §5-2 细胞学基础及细胞工程定义 细胞的结构与运行机制 细胞工程的定义 细胞（生命基本单元）的结构 生物膜系统：细胞膜及细胞器 遗传信息表达系统：细胞核、质粒、核糖体 细胞功能系统：细胞质及细胞器 细胞工程定义 宏观工程 微观工程 细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。 有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。 §5-3 细胞培养 植物细胞培养 动物细胞培养 宏观工程 植物细胞培养 动物细胞培养 悬浮式 贴壁式 混合式 动物细胞培养 滚瓶机 §5-4 微观细胞工程 细胞重组和拆合 细胞融合 干细胞工程 胚胎工程 人造细胞——…… 细胞重组与拆合 1938，第一人：汉斯-施佩曼（蝾螈） 1961，中国，童第周 （1989年鲤鲫核鱼） …… 克隆动物 细胞融合不同细胞融合在一起 三种常见方法： 物理法、化学法、生物法 与重组基因导入方法对比 细胞融合 杂交瘤技术与单克隆抗体 单克隆抗体技术 干细胞工程 干细胞的定义 具有自我复制能力（self-renewing）的多潜能细胞。可分化成多种功能细胞。 根据干细胞所处的发育阶段分为： 胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）和 成体干细胞（somatic stem cell）。 干细胞（Stem Cell）