电离辐射对O-2A祖细胞分化的影响离体实验.pdfVIP

电离辐射对O．2A祖细胞分化影响的离体实验 序言 形胶质细胞。O一2Ap“m咖‘细胞在出生后6周内消失。成年脑内也存在 O一2A细胞，被称为O．2A础m‘。体外研究显示二者的生物学特性不同。 O．2A山“的细胞标志物为04，与A285结合较弱；细胞周期较长， 移动性差。有作者提出，二者生物学特性差异的根本原因不在细胞 本身，而是由于它们所处的微环境不同。 O一2A的存活、增殖、分化和迁徙等生物学特性与形成和维持 CNS的正常生理功能密切相关。电离辐射对CNS中的O．2A的影响 将直接导致少突胶质细胞来源不足，所以在进行性的脱髓鞘和白质 凝固性坏死的研究中，O．2A被作为主要的辐射靶细胞。有文献报道 在离体实验中，辐射能引起少突胶质细胞凋亡，并存在时间和剂量 依赖性，而O．2A细胞和未成熟少突胶质细胞无明显细胞凋亡现象， 单次40Gy的剂量照射基本可以使脑内的少突胶质细胞祖细胞完全 消失，但未对0．2A的增殖、分化情况作进一步研究。 本研究旨在建立混合胶质细胞培养模型，并且从细胞水平了解体 外O-2A祖细胞分化的早期放射性反应，了解其生物学变化，探讨 早期放射性脑损伤的发病机制。 电离辐射对O．2A祖细胞分化影响的离体实验 第一部分弟一鄙贫 混合胶质细胞的原代培养及鉴定 神经组织主要由神经元和神经胶质细胞构成，星形胶质细胞在中 枢神经系统的各种胶质细胞中数量最多，分布最广，担负着神经胶 质细胞的大部分功能，包括：支持；修复与再生：吞噬和保护；运 输营养；参与构成血脑屏障：摄取化学递质和分泌功能等。星形胶 质细胞在神经系统的正常生理活动和病理生理学过程中皆有着极其 重要的作用[¨。星形胶质细胞活动的异常可导致神经元功能的异常。 Raft等根据星形胶质细胞对神经节苷脂A285抗体反应的不同， 将其分为1型星形胶质细胞(type一1 质细胞(type-2 A285阳性，T1A牙r[JT2A胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillatyacidprotein． GFAP)标记均阳性。两型星形胶质细胞分别来自不同的谱系，T1A 2 cells)，从而提出了星形 (oligodendrocyte—typeastrocyte progenitor 胶质细胞发生分化的“双谱系学说”f2】。 0-2A祖细胞是双潜能干细胞，既能分化为少突胶质细胞(OL)， 又能分化为2型星形胶质细胞(T2A)。研究发现，O．2A祖细胞具 电离辐射对0．2A祖细胞分化影响的离体实验 第一部分引言 有重要的功能：①分泌生长因子，促进多巴胺神经元的存Nt3】；② 具有诱导分化成为神经元的潜能141；③参与神经元的信号传导[51； ④参与中枢神经系统损伤的修复㈦71。因此，O．2A祖细胞，将有 助于深入了解其存活、增殖、分化以及对其它细胞的作用等生物学 行为特征，也可为中枢神经系统疾病的移植治疗提供材料。 我们在这里建立混合胶质细胞培养模型，为研究辐照后O一2A祖 细胞增殖和分化的改变提供条件。 电离辐射对O．2A祖细胞分化影响的离体实验 第一部分材料 材 料 一、 实验动物 新生(P0．P1)SD大鼠，由苏州大学医学院实验动物中-11,提供。 二、主要设备 1．C02培养箱 2．倒置相差显微镜 (日本Olympus公司) 3．超净工作台 (VS-1300一U，苏州净化安泰集团公司) 4．消毒箱 5．微量移液器 6．细胞培养瓶及培养板 (美国Coming公司) 三、主要试剂 1．DMEMfF一12干粉培养基(美国Gibico BRL公司) 2．B27