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两种制备冷沉淀方法比较 　 作者：杨玉峰，黄春萍，赵 云，沈华仙 【摘要】 目的：通过对改良快速融化离心法和水浴虹吸法制备冷沉淀的质量比较，选择合适的制备冷沉淀的方法。方法：利用血凝分析仪检测冷沉淀中FⅧ和Fg的含量，电子称称量血袋重量并计算容量，计算三者的合格率。结果：改良快速融化离心法和水浴虹吸法的FⅧ含量(IU／袋)分别为：(86.75±24.91)、(62.91±22.87)，差异有显著性(P＜0．05)，合格率分别为：100％、91.7％，差异无显著性(P＞0．05)；Fg的含量(mg／袋)分别为：(142.16±27.53)、(117.91±31.99)，合格率均为：100％，差异无显著性(P＞0．05)；容量(ml／袋)分别为：(25.4±4.3)、(27.3±2.3)，合格率均为100％，差异无显著性(P＞0．05)。结论：两种方法都能制备出符合GB18469－2001《全血及成分血质量要求》的冷沉淀，但改良快速融化离心法制备的冷沉淀FⅧ含量要优于水浴虹吸法。 【关键词】 冷沉淀；凝血因子Ⅷ；纤维蛋白原；容量；质量标准 　　冷沉淀是目前临床常用的一种血液成分，是新鲜冰冻血浆在1 ℃～5 ℃的条件下不溶解的白色沉淀物，其主要含有凝血因子Ⅷ（FⅧ），纤维蛋白原（Fg）、vW因子(von Willebrand factor)、凝血因子ⅩⅢ（FⅩⅢ），以及纤维结合蛋白（Fn）等成分。由于其中含有一些不稳定的凝血因子，特别是FⅧ因子，容易降低或失去活性，从而影响冷沉淀的质量。现将两种方法制备的冷沉淀质量情况，报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 仪器和材料 日本Sysmex CA50自动血凝分析仪，试剂：德国Dade Behring Marburg公司生产（APTT,批号：537108；Owren’s Veronal缓冲液，批号：527634；乏因子Ⅷ血浆，批号：536502A），苏州医用仪器厂的KJX一Ⅲ型冰冻血浆解冻箱,德国贺利氏6000 i容量冷冻离心机，常熟双杰测试仪器厂生产的GαGDT 1000电子称。 　　1.2 方法 　　1.2.1 原料血浆 采集全血后6 h内，3 000 g，4 ℃，10 min，离心分离制备新鲜冰冻血浆（FFP），放入－50 ℃冰箱快速速冻后，置入－20 ℃以下的冰箱保存。冷冻24 h以上的FFP用于制备冷沉淀［1］。 　　1.2.2 改良快速融化离心法 将FFP放入(3±1) ℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中，待FFP融化到一半多时取出血浆袋,将还未融化的血浆块捏散成碎冰块，加速其溶解，然后继续放入恒温循环水槽中融化，待剩少许碎冰块时,及时取出，3 000 g,0 ℃,10 min离心,分离出上层血浆，下层(25±5) ml血浆和白色沉淀物即为冷沉淀，将其快速置于低温速度冰箱中冻结。 　　1.2.3 水浴虹吸法 将联袋装有FFP袋子置于(3±1) ℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中，另一空袋悬于箱外，两袋之间有一定的落差。FFP融化时，由于虹吸的作用，融化的血浆流入空袋中，剩余的(25±5) ml的有白色结晶颗粒的血浆块即为冷沉淀，将其快速置于低温速度冰箱中冻结。 　　1.2.4 FⅧ和Fg的检测方法 按试剂说明书操作。 　　1.2.5 容量计算［2］。 　　1.2.6 质量标准 按照GB18469－2001《全血及成分血质量要求》规定，由100 ml FFP制备的冷沉淀(0.5 u)：FⅧ含量≥40 IU／袋，Fg含量≥75 mg／袋，容量：(25±5) ml，符合质量标准者为合格。 　　　1.2.7 统计学方法 t检验和四格表的确切概率法。 　　2 结果 　　2.1 两种方法制备冷沉淀比较 将随机抽取的24袋100 ml FFP，随机分成两组，用上述两种方法分别进行检测，见表1。 　　表1 两种方法制备冷沉淀三种指标比较（略） 　　2.2 两种方法制备冷沉淀的三种指标合格率比较 改良快速融化离心法制备的FⅧ含量合格率为100％（12/12），水浴虹吸法的FⅧ含量合格率为91.7％（11/12），两者差异无显著性（见表2）；两种方法检测的Fg含量均为100％的合格率，差异无显著性；两种方法制备的容量合格率也为100％，差异无显著性。 　　表2 两种方法制备冷沉淀合格率比较方法 略 　　2.3 两种方法三相指标均合格的合格率比较 符合GB18469－2001《全血及成分血质量要求》对冷沉淀的要求，改良快速融化离心法制备的冷沉淀合格率为100％，水浴虹吸法的为91.7％,差异无显著性。 　　3 讨论 　　 　　冷沉淀通过静脉滴注、局部注入、局部喷洒或点滴、口服的方式，广泛应用于临床的甲型血友病、深度烧伤、肿瘤手术、皮肤、黏膜疾病、角膜疾病、弥散性血管内凝血（DIC）、多发伤和手