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大孔吸附树脂分离纯化鬼针草总黄酮探究 　【关键词】 鬼针草；,,总黄酮；,,大孔树脂 　　摘要：目的研究大孔吸附树脂富集纯化鬼针草总黄酮的最佳工艺条件及参数。方法采用不同浓度的乙醇梯度洗脱,以紫外分光光度法测定鬼针草总黄酮收率和纯度为指标。结果实验条件下，采用D301型大孔树脂进行吸附,20%乙醇100 ml洗脱，经大孔树脂处理后浸膏的总黄酮含量可达60%以上。结论 该法可为鬼针草新制剂的研制与生产提供原料药。 　　关键词：鬼针草； 总黄酮； 大孔树脂 　　Study on the Isolation and Purification of Total Flavonoids from Bidens bipinnataL. with Macroporous Resin 　　Abstract：ObjectiveTo explore the optimal purification condition of total flavonoids from Bidens bipinnata L. with macroporous resion.MethodsGradient elution was used to elute the components absorpted on macroporous resin guided by the isolation-purification degree and the recovery rate.ResultsThe content of total flavonoids in obtained ointment could reach 60% under the condition that D301 type macroporous resin was used as absorption agent and 100 ml 20% ethanol as elution agent.ConclusionThe method appeared to be feasible to isolate and purify total flavonoids from Bidens bipinnata L.. 　　Key words：Bidens bipinnata L.; Total flavonoids; Macroporous resin 　　鬼针草为菊科植物鬼针草的全草，具清热解毒、散瘀消肿之功效［1］，药理和临床报道对原发性高血压有明显疗效，其降压有效成分主要为黄酮类化合物［2］。目前国内上市的有关鬼针草提取物的制剂主要有鬼针草颗粒剂、悦年片、悦年茶等，鬼针草药源充足，价格低廉，开发前景广阔。本实验采用大孔树脂对鬼针草总黄酮进行了分离纯化，工艺简单，切实可行，可为含鬼针草新制剂的研制与生产提供原料药。 　　1 器材 　　UV757CRT紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂)；电子精密天平（奥豪斯国际贸易有限公司）。鬼针草Bidens bipinnata L.购自山东建联中药店，经该店姚庭芝主任药师鉴定，芦丁对照品购自中国生物制品检定所，大孔树脂分别购于天津南开大学、成都晨光化工研究院及日本三菱公司。所用试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 鬼针草总黄酮的含量测定 　　2.1.1 标准曲线制备精密称取经五氧化二磷干燥恒重的芦丁对照品7.00 mg，30%乙醇溶解并定容至25 ml，即得每毫升含无水芦丁0.28 mg的芦丁对照品溶液。分别精密量取0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml芦丁对照品溶液置于10 ml容量瓶中各加30%乙醇至1 ml，加入5% NaNO2 0.5 ml放置6 min后再加入10% Al(NO3)3 0.3 ml，摇匀放置6 min后加入4% NaOH 3 ml，摇匀放置15 min在510 nm处测定。以相应试剂做空白分别测定吸光度，以吸光度对浓度进行回归，绘制标准曲线，回归方程：Y=2.376X，r=0.999 7。 　　2.1.2 鬼针草药材总黄酮的含量测定 精密称取鬼针草3.000 g，加入60%乙醇100 ml，置沸水浴中回流1 h，冷却，过滤，用60%乙醇50 ml洗涤，移液至250 ml容量瓶，用60%乙醇定容至刻线，精密量取鬼针草溶液1.0 ml，至10 ml刻度试管中，按标准曲线制备项下方法测定含量，鬼针草中总黄酮的含量（17.25±0.59） mg#12539;g1（n=4）。 　　2.2 大孔树脂纯化工艺的考察 　　2.2.1 大孔树脂的预处理将树脂装入吸附柱中，并保持 95%乙醇面高出树脂表面浸泡。95%乙醇洗涤树脂层，至流出液加蒸馏水不呈白色浑浊，再用蒸馏水洗至无醇味即可。用后的树脂以95%乙醇洗涤至洗脱液近