宫颈病变中HPV替代标志物探究.docVIP

宫颈病变中HPV替代标志物探究 　【关键词】 宫颈病变；HPV；替代标志物 　　［摘 要］ HPV作为宫颈病变标志物研究已取得了很大的进展，但其作为筛查指标特异性和灵敏度还不够，近年来宫颈颈癌发生和肿瘤进展的分子机制成为研究的热点，本文对HPV的几个替代标志物p16INK4a、cyclin E、端粒酶、Ki-67、PCNA和中心体数目进行了综述。 　　［关键词］宫颈病变；HPV；替代标志物 宫颈癌的HPV相关致瘤基因的细胞基因的异常表达分析可替代HPVDNA试验。HPVE6和E7蛋白与包括许多细胞生长和分化调节细胞因子间的相互作用，HPV和宿主细胞器间的复杂的交互作用是宫颈瘤形成的潜在基础。因此，弄清楚这些交互作用的分子机制和对被HPV特异调节的基因的认识有助于宫颈癌诊断和治疗新方法的进展，有助于从开始发病过程中分辨出真正的瘤形成。最近在众多可能替代的标志物中选出了以下几种：p16INK4a(cyclindependent kinaseinhibitor p16)、周期蛋白E(cyclin E)、端粒酶(telomerase)、Ki~67、PCNA(proliferatingcell nuclearantigen)和中心体数目(centrosome)，似乎最有可能成为对宫颈鳞状细胞的HPV感染检测的替代标志物。 　　1 p16INK4a 　　真核细胞的细胞周期的进程是被细胞因子依赖杀伤性间连续不断的相互作用和激活来调节的。CDKI(cyclin dependent kinase inhibitor)激活的调节是由它们翻译后修正(磷酸化作用／脱磷酸化作用)和细胞因子间的相互关系来测定。CDK的激活引导RB(retinoblastoma protein)的磷酸化作用，至少部分地控制从G1到S相的进程，E2F转录因子的活力被封闭。因为它们容易致瘤的特性，细胞因子的活力和有助杀伤，有必要小心地在多个水平上进行调节。CDK抑制蛋白，如p16INK4a，与CDK4和CDK6间特异的相互作用阻止了RB磷酸化和不断的E2F激活和细胞周期进程。因此，CDK抑制蛋白功能作为肿瘤抑制物和它们的灭活有助于癌症进展［1］。 　　高危型HPV持续感染的宫颈角化细胞p16INK4a蛋白过度表达，虽然它的细胞机制不完全清楚，但据证实HPV感染细胞内p16INK4a上调更可能导致E7调节RB的降解，将负调控p16INK4a的表达［2］。尽管它的异常表达，p16INK4a在这些细胞中不具备生物活性，因为功能性RB需要对p16INK4a显示出生长抑制效应［3］。困此，即使有高水平p16INK4a存在，HPV感染细胞仍能增殖和发生癌性转化。这些发现证实p16INK4a对检测活化的高危型HPV感染细胞是一种特异和灵敏的替代生化标志物。 　　Klaes［4］等在石蜡包埋组织中，在高危型HPV感染相关所有的宫颈间皮病变和60例浸润型宫颈癌的58例胞浆中，观察到对p16INK4a强的免疫结合。在低危型HPV阳性的正常宫颈上皮、炎性病变、低度宫颈病变中观察到非特异性结合。相似的结果被Keating［5］等报道，高危型HPV感染的宫颈上皮细胞显示的结果是强的弥漫的胞浆p16INK4a着色。在基底上皮有弥漫的但微弱的胞浆着色、在化生细胞内有局部着色、在萎缩上皮内未见着色。 　　虽然这些研究是在少数标本中进行的，但结果显示p16INK4a的检测可能作为一种替代标志物用于分辨增殖异常的宫颈上皮细胞。 　　2 Cyclin E 　　在Tae Kim［6］等的一个研究中，Cyclin E在23例CIN中有7.1%、在45例浸润型宫颈癌中有12．3%、而对照组中只有1．2%(22例)。在45例浸润型宫颈癌中，CyclinE的指数在鳞癌中有15．5%、腺癌中有4.6%、腺鳞癌中有9．2%。Keating［5］等报道CyclinE着色和HPV阳性间密切相关。61例HPV阳性病例中的51例，包括41例高危型HPV中的38例和20例低危型HPV中的13例CyclinE阳性。57例CyclinE阳性中的51例HPV也表现为阳性。这个结果显示CyclinE阳性与HPV阳性相关性的预期值和特异性分别是89．5%和84%。在33例LSIL中的75．7%，Cyclin E显示出浓厚的着色，而所有湿疣上皮着色限定在2／3以上，22例LSIL的77%上皮着色小于2／3。因为它的高度特异性，研究者认为CyclinE像p16INK4a一样有助于在正切部分或不好定向的伴或不伴非典型的上皮异常中检测HPV调节上皮损伤［3，7］。在本研究中，CyclinE阳性在液态宫颈拭子中的高度发育不良细胞中检测到。 　　Weaver［7］等研究了CyclinE在液态宫颈标本中作为一种检测HPV相关病变诊断标志物的应用。在所有20例