益气活血解毒法对溃疡性结肠炎模型大鼠血浆及结肠组织P选择.docVIP

益气活血解毒法对溃疡性结肠炎模型大鼠血浆及结肠组织P选择 　 作者：安贺军　王新月　于玫　沈静许丽艳　 林芳冰 【摘要】 【目的】　观察益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血浆及结肠组织P选择素表达的影响。【方法】 选用SD大鼠，随机分为4组，即正常组、模型组、中药组(灌胃20g·kg-1·d-1剂量的溃结复发方)、西药组(灌胃0266g·kg-1·d-1剂量的畅美混悬液);分别于给药后10、30 d和停药后10 d取材，采用酶联免疫吸附法检测各组血浆P选择素含量，免疫组化法检测结肠组织P选择素的表达。 【结果】模型组各时间段血浆P选择素含量显著升高(均Plt;005或Plt;001)，中药组各时间段血浆P选择素含量显著低于模型组(均Plt;005或Plt;001)，西药组治疗10d及治疗30d时血浆P选择素含量显著低于模型组(Plt;005或Plt;001);模型组各时间段结肠组织P选择素表达显著高于正常组(均Plt;001)，中药组治疗30d及停药后10d结肠组织P选择素表达显著降低(均Plt;001)，且停药后10d作用优于西药组(Plt;005);西药组治疗10d及治疗30d结肠组织P选择素表达显著降低(均Plt;001)，且治疗10d时作用优于中药组(Plt;001)。【结论】益气活血解毒法抗UC复发的作用可能与其能有效降低模型大鼠的血浆及结肠组织P选择素水平，阻抑血小板活化有关。　 【关键词】 益气活血解毒法;　结肠炎/中药疗法;　P选择素/血液;　结肠/病理学;　疾病模型，动物;　大鼠 溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种以慢性炎症和溃疡形成为主要病理特征的消化道疾病。由于其患病率逐年增加、高复发率、与结肠直肠癌发生关系密切而成为目前研究热点。本研究观察了益气活血解毒法组成的溃结复发方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的UC模型大鼠血浆及结肠组织P选择素表达的影响，探讨其抗溃疡性结肠炎复发的作用机制。现将结果报道如下。 　　1　材料与方法 　　11　实验动物　清洁级健康雄性SD大鼠，体质量160～200g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(京)20060006。 　　12　主要试剂与仪器　2、4、6三硝基苯磺酸(TNBS)为Sigma公司产品，批号：074K007;水合氯醛购自恒业中远化工有限公司;酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒由美国RB公司进口分装，购自北京百事创新科技有限公司;免疫组化法检测试剂盒购自北京百事创新科技有限公司;LDZ52型离心机由北京医用离心机厂生产;Labsystems Dragon Wellscan MK3全自动多功能酶标仪;Shandon全自动石蜡包埋机;Shandon全自动石蜡切片机;Olympus Vanox显微镜;Nikon显微照相系统;Imagepro Plus 41图像分析系统。 　　13　药物　溃结复发方主要药物组成有炒五灵脂10g、生蒲黄10g、当归10g、赤白芍各10g、焦槟榔10g、煨木香10g、黄连10g、黄柏10g、生黄芪30g、连翘20g、炒白术10g，均购自北京中医药大学东直门医院，由北京中医药大学东直门医院制剂室煎制，灌胃剂量为体质量60kg成人药量的8倍;奥沙拉秦钠胶囊剂(畅美)由天津力生制药有限公司生产， 灌胃剂量为体质量60kg成人药量的8倍。 　　14　动物模型复制[1-2]　将大鼠正常饲养1周后，禁食24h(不禁水)，称体质量，100mg/L水合氯醛(38mL/kg)腹腔麻醉，将一直径2mm、长约12cm的橡胶管由大鼠肛门轻缓插入，约深8～10cm，然后以085mL TNBS/乙醇液(120mg/kg TNBS+体积分数50%乙醇025mL)，约5s灌注完毕;将造模鼠倒置8min后(尽量减少造模试剂流出)放回笼内。 　　15　动物分组及给药　将120只大鼠随机分为4组，其中模型组、西药组、中药组每组各30只，均予造模;正常组30只，不予造模，但与其他3组同步禁食、麻醉，同步饲养观察。于造模后第2天起正常组、模型组以蒸馏水灌胃，每次1mL/只;西药组以畅美混悬液按0266g·kg-1·d-1剂量灌胃给药;中药组以溃结复发方按20g·kg-1·d-1剂量灌胃给药，均每天1次，共40d。 　　16　取材　分别于给药后10、30d和停药后10d，各组随机取10只大鼠，以100mg/L水合氯醛(3