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第二章--工具酶
基因工程
第二章 基因工程工具酶和载
体
湖南师范大学生命科学学院
袁婺洲
2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院
基因工程
本章目录
•2.1 工具酶
•2.2 克隆载体
•2.3 表达载体
2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院
基因工程
第一节 工具酶
• 限制性核酸内切酶
• DNA连接酶
• DNA聚合酶
• 碱性磷酸酶
• 末端转移酶
• 其他工具酶
2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院
基因工程
一、限制性核酸内切酶
识别双链DNA分子中的特定序列,并切割DNA双
链
• 1968年,Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出
Hind II和Hind III
主要存在于原核细菌中,细菌的限制与修饰作用,帮助
细菌限制外来DNA的入侵
2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院
基因工程
限制性核酸内切酶的命名
属名 种名 株名 H i n d III
Haemophilus influenzae d 嗜血流感杆菌d株
2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院
限制性核酸内切酶的分类 基因工程
特性 I型 II型 III型
核酸内切酶和甲
限制和修饰活性 双功能的酶 双功能的酶
基化酶分开
酶蛋白分子组成 3种不同的亚基 单一亚基 两种不同的亚基
限制作用所需的辅助 2+ 2+ 2+
ATP、Mg
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