组织DNA提取说明说.pdf

HiPure Tissue Blood D NA K it 组织血液细胞通用型DNA提取试剂盒 从组织细胞细胞中抽提高纯度的DNA 目 录 简 介2 原 理2 试剂盒组成3 保质期3 准备工作4 方案1:动物组织DNA 抽提5 方案2:血液和体液 DNA 提取7 方案3:培养细胞DNA 抽提9 常见问题回答11 版本: 2010-01 第 1 页 共 12 页 简 介 HiPure Blood Tissue DNA Kits为动物组织、培养细胞、血液、唾液和其它体液样品的 总DNA提取提供了一个简单快速的解决方案。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需 使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需30-60分钟。HiPure Blood Tissue DNA Kit一次可处理1-20mg动物组织，1-250µl抗凝血液和体液样品， 6 以及小于5x10 个培养细胞。得到的DNA可直接用于PCR, 定量PCR,SouthernBlot, 病 毒DNA检测等实验。 原 理 HiPure硅胶柱是采用高结合力的玻璃纤维滤膜为基质。滤膜在高浓度离子化剂(如盐酸胍或 异硫氰酸胍)条件下，可通过氢键和静电等物理作用吸附核酸，而蛋白质或其它杂质不被吸附 而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除蛋白质和盐，最后可以用低盐缓冲液(如Buffer TE) 或水，洗脱出滤膜上吸附的核酸。得到的核酸纯度高，可直接用于各种下游实验。 HiPureBlood Tissue DNA Kit基于硅胶柱纯化方式。样品在裂解液(Buffer ATL)和蛋白 酶作用下裂解消化，DNA释放到裂解液中。加入Buffer AL和乙醇后，转移至柱子中过滤， DNA被吸附上柱子的膜上，而蛋白质则不被吸附而随溶液滤出去除。柱子经BufferDW1洗 涤蛋白质和其它杂质，经BufferDW2洗涤去除盐分，最后DNA被低盐缓冲液(10MmTris, pH8.5)洗脱。洗脱的DNA可直接用于PCR、Southern blot、病毒检测等实验。 第 2 页 共 12 页 组 成 HiPureBlood Tissue DNA Kit 产品编号 D3018-01 D3018-02 D3018-03 纯化次数 10次 50次 250次 HiPure gDNA Mini Columns 10 50 250 2ml Collection Tubes 20 100 500 Buffer ATL 4 ml 20 ml 80 ml Buffer AL 4 ml 20 ml 80 ml Buffer DW1 7 ml 30 ml 150 ml Buffer DW2 5 ml 20 ml 2 x 50 ml RNase Solution 100 µl 280 µl 1.4 ml Pr