内生细菌b3鄄7的运动性参与其在小麦根系的内生定殖-植物病理学报.pdfVIP

植物病理学报 ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA摇 41(5):526鄄533(2011) 内生细菌 B3鄄7 的运动性参与其在小麦根系的 内生定殖和对小麦全蚀病的生物防治 1,2 * 1 1 1 王 刚 , 刘凤英 , 王 淼 , 彭 玲 1 2 ( 河南大学生命科学学院, 开封475004; 河南大学生物工程研究所, 开封475004) 摘要: 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)B3鄄7是一株对于小麦全蚀病具有有效生防作用的小麦内生细菌。 为了研究B3鄄7在 小麦根内的定殖机制,本研究将含有转座子 TnYLB鄄1 和温度敏感型复制子的质粒 pMarB 转化 B3鄄7 菌株,高温处理后 TnYLB鄄1插入细菌基因组中,构建转座子插入突变体库。 通过筛选,获得1株在小麦根内定殖能力显著降低的突变体B3鄄7鄄 458。 利用反向PCR方法分离转座子插入位点的侧翼序列并分析其特征,发现转座子插入导致细菌鞭毛运动性相关基因 mota失活,同时发现mota失活菌株对于小麦全蚀病的生防能力降低。 通过构建互补载体对突变基因mota进行互补分析, 发现互补菌株的运动性、在小麦根系内部的定殖能力以及对于小麦全蚀病的生防能力得以恢复。 本研究证明了生防菌蜡 样芽孢杆菌B3鄄7 的mota基因参与该菌株在小麦根系的内生定殖,也参与了该菌株对于小麦全蚀病的生物防治。 关键词:内生细菌;定殖;运动性;小麦全蚀病 Motility of endophytic bacteria strain B3鄄7 involved in endophytic colonization of wheat roots and biological control of wheat take鄄all摇 1,2 1 WANG Gang , LIU Feng鄄ying , 1 1 1 2 WANGMiao ,PENGLing 摇 ( Collegeoflife sciences,HenanUniversity,Kaifeng475004,China; InstituteofBioengi鄄 neering,Henan University,Kaifeng475004,China) Abstract: Bacillus cereus strain B3鄄7 isolated from wheat rootsisan endophyticbacteria,andhasbiological control activityagainsttake鄄allofwheatincitedby Gaeumannomycesgraminisvar. tritici. Toelucidatecoloni鄄 zation mechanism of B3鄄7within wheatroots,transposonTnYLB鄄1wasintroducedintogenome ofB3鄄7anda transposon insertion mutant library was constructed. Mutants with altered colonization numbers within wheat rootswere then screened and one mutant designated as B3鄄7鄄458 with low root colonization ability was ac鄄 quired. The flanking sequence around transposon insertion site wasanalyzed with reverse PCR and the results showed mota gene