5鲁辛辛-微生物MALDI-TOF MS技术的常规应用与开发.pdfVIP

微生物MALDI-TOF MS技术的 常规应用与开发 鲁辛辛 首都医科大学附属北京同仁医院 2015-7-30（第三届质谱继教） 主要内容 • 质谱及MALDI-TOF MS的基本原理 • MALDI-TOF MS的常规应用 • MALDI-TOFMS的开发应用 – 血培养报警及体液直接鉴定 – 耐药性分析 – 同源性分析 • 应用说明 2015年上半年重要质谱新品介绍 • 美国2015年上半年质谱年会：飞行时间质谱(TOF)创新研发超过过三 重四极杆质谱和其它类型质谱： – Waters行波离子淌度质谱：增加了碰撞截面值(CCS)的分离维度，其分离效果显 著提高，在蛋白质、多肽及复杂化合物异构体分析方面具有独特优势，还有AB Sciex、Agilent 的离子淌度质谱 – Thermo Fisher 的Q Exactive GC四极杆串联轨道阱GC-MS/MS是第一款将气相色 谱和高分辨精确质量的Orbitrap质谱结合在一起的商业质谱，这是世界上首台气质 联用Orbitrap质谱 – 日本电子的DART离子源的TOF整机和全二维气质 – 提高灵敏度研究，如Agilent和岛津的新款三重四极杆质谱（每年一款） – 应用领域竞争激烈：组学研究、生物医药、食品安全和同位素标记方面 • 我国的采购仍以四极杆质谱为主54%，TOF20% • 我国质谱研发 安捷伦Q-TOF 6545 安捷伦LCMS-6470 日本电子AccuTOF-GCx 和 岛津LCMS-8060 AccuTOF-DART 4G 沃特世Vion IMS Qtof 赛默飞Q Exactive GC 赛默飞 Fusion Lumos Tribrid 厦门质谱microTyper MS 1. 质谱及MALDI-TOF的基本原理 • 质谱是一种与光谱并列的谱学方法，它通过制备、分离、 检测气相离子鉴定化合物的一种专门技术； • 质谱一次分析可提供丰富的结构信息，将分离技术与质谱 法结合是分离科学中一项突破性进展； • 因高特异性和高灵敏度得到广泛应用的普适性方法； • 质谱仪是分离和检测带电物质的质量差异的一类仪器，由 样品导入系统、离子源、质量分析器、检测器、数据处理 系统等部分组成。 续 • 质谱分析是一种测量离子质荷比（质量- 电荷比，M/Z）的 分析方法，由Joseph John Thomson建立； • 使样本中各组分在离子源中发生电离，生成不同质荷比的 带电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质 量分析器。在质量分析器中，利用电场和磁场发生相反的 速度色散，将它们分别聚焦得到质谱图，从而确定质量； • 第一台质谱仪是英国科学家弗朗西斯·阿斯顿于1919年制 成的。阿斯顿用这台装置发现了多种元素同位素，研究了 53个非放射性元素，发现了天然存在的287种核素中的 212种，第一次证明原子质量亏损，为此荣获1922年诺贝 尔化学奖。 续 • 有机质谱仪 – 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS, gas chromatography）：气相 色谱-四极质谱仪、气相色谱-飞行时间质谱仪、气相色谱-离子阱 质谱仪等； – 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）：液相色谱-四极滤质器质谱仪、 液相色谱-离子阱质谱仪、液相色谱-飞行时间质谱仪、以及液相色 谱-质谱-质谱联用仪； – 其他有机质谱仪，如:基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪 （MALDI-TOF MS