环孢霉素A对NIT-1胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌影响及其在基因水平上作用机制.pdf

almRNA波达上调，与 理NIT—l壤岛§细胞24h后，孳|起Pol a 对照组相比越一E调的百分率为34，5％；而处理48h后，日1起Pol 1 mRNA表达下调，与对照组相比其下调的百分率为20．6％。这一 作用与CsA对NlT—l胰岛8细臌增殖的双向性影响相一致，即在 处理24h簸越键进{乍用，露48磊起季枣割{乍鼹。 2、CsA对NIT—l获岛§纲魄馥趣素分泌黪影响及其在基因 水平上的作用机制体外培养NIT一1胰岛13细胞，用不同浓度的 72h后，以放射兔疫测定法(RjA)检测药物对细胞累积胰岛素分 泌蛇影响，续果显示用不同浓度驰CsA处理NlT—l胰袅§细胞 24h，48h稳72h嚣，玛可雩l起维藏簇岛素分泌兹下洚，盈随着CsA 剂量的加大摊制作用越明显。棚嗣的培养条件下，用不含葡萄糖 缓冲液(分别禽葡萄糖3uM和25tXM)，孵育1h，以放射免疫测定 法检测药物对细胞基础胰岛索分泌和葡萄糖刺激性胰岛素分泌的 影稳，结鬃袭明CsA短麓娃瑗缫藏鑫霹挺遂基麓耪麓麓耱裁激戆 胰岛素释放，并其有一定的剂爨依赖往。并用半定激RT--PCR法 检测10}lMCsA处理细胞24h和48h后，对线粒体氧化磷酸化酶系 示，建109MCsA处理鲴腿24h鞠48h蓐穆霹不同程度瓣帮翱线粒 俸氧纯磷酸纯懿系中6种主要鹣mRNA的表达，簸理24h磊对 mRNA表达的抑制率分 Nuox9，Nuox23，Uqcr，Cox7c，Atp50和Atp5k ％。lOpM 其表达，抑制率分别为22．6％葶珏63．0％。 4 结论 l、CsA对NIT--t簇岛§续赡蹭滚懿彩噙具簿双瓣瞧。较裹裁整 的CsA(堇5rtM)处理细胞24h屑可促进细胞增殖，处理48h 以上剡掺制缁腿增骧，著其鸯…患豹裁量姣赖髅。 鬃积簇麓豢分泌，其掷番l手譬羽其露翔量袄赖瞧，酃麓着裁量的 堪勰静制{萋髑越明曼。 3、CsA处瑗NlT一1胰岛8细胞ih艏，可促进藻础和葡萄糖刺激 性膜岛絮释放。 4、10rtM 8 lmRNA表达，处理缀您48h巷，对PollmRNA表达刘产生 下调髂用。 一1胰岛B细胞线粒体氧化磷酸化酶系揍因的表达，除了对 Nuox9 mRNA表这静静涮{筝弱在24h移48h没鸯爨瀑嚣翔井， 的表达随簧菊物处理时间的延长，抑制表达的俸翅越明显。 6、109M CsA她溅NlT—l簇鹅§缨艨24h爻重线蔽体缓耱俸蛋塞蘩 处理48h矮对蒺表达其蠢髑嚣戆攒割据用。 关键调：嚣：獭霉綮A，NIT--1麓逡叠缍斑，缨藏鬻藕，MTT,簇 岛素，放懿免疫测定法，线糖体，襞证磷酸纯，半定量RT--PCR andActionMechanismof Aon Effects Cyclosporin NIT-1cells andinsulinsecretion proliferation ABS茧戳≮C鬻 objeetive a CyclosporinA(CsA)ispotentimmunosuppressivedrug usedfbr of a矗er widely preventionallograft哟ectionorgan as transplantation，such lungs．