使用琼脂糖凝胶电泳和免疫结合琼脂糖凝胶电泳方法分别电子科学技术.PDFVIP

遗 传 学报 8(3):228 Acta Cenetica Sinica 中国人补体第3成份 C（3）和备解素 因子B(Rf 的遗传多态性1) 赵桐茂 姜毓敏 卢月香 上（海市中心血站） 使用琼脂糖凝胶电泳和免疫结合琼脂糖凝胶电泳方法分别调查了补体第3成份 C（3）和 备解素因子 B(Bf）在中国人中的多态性。在388名无关个体中，有两种常见的 C3表现型 SS 和 FS，基因频率为 C3F二0.0039,C3s二0.9961。未发现稀少的 C3变异型。在200例无 关个体中，Bf表现型为S15，人，FS38人，F6人以及I例FS0.7。基因频率为Bfs二 0.8700,BfF＝＝0.1273,BOO.，二0.002$,C3和 Bf表现型分布与 Hardy-Wei.nberg平衡相 一致。 人类补体系统包括Ciq,C1r,C1,,C2,C3,C4,C5,C6,C7,C8,C9以及备解 素因子B(properdinfactorB，简称Bf）等组份，它们与人体的免疫反应密切有关。自从 1968年Alpe：等人DI使用琼脂糖高压电泳首先发现C3的遗传多态性以来，几乎所有的 补体成份都被检出有遗传变异体L23。这些变异体又被称为同种异型 a（llotype)，它们很可 能是串联重复基因 t（andemlyduplicatedgene）的产物[610 研究补体遗传及其与其他基因的遗传关系，是免疫遗传学的一个重要内容，它对于取 得有关高等动物补体系统进化的信息，阐明补休缺陷病及某些遗传性疾病的病因有很大 作用。现在已知 Bf位点与人体主要组织相容性复合体，即 HLA紧密连锁，同在第六对 染色体短臂上9]〔，与免疫反应关系非常密切，所以更为人们所注意。此外，补体的同种异 型作为一种遗传标记，在亲生子鉴定和人类学研究中也是一个有力的工具。国内尚无关 于中国人C3和Bf同种异型分布情况的报道，本文系首次报道。 材 料 与 方 法 一（）血清标本 取自无亲缘关系的健康供体，大多数为居住在上海地区的汉族 人。静脉采血后1小时内分离血清，贮于一200C，两天之内进行试验，以防 C3失活。 二（）已知型别的C3和 Bf标准血清 瑞士红十字会输血中心实验室提供，作 对照用。 三（）C3同种异型的鉴定 使用TeisbergW，方法，即把新鲜血清加在玻璃板 本文于1980年8月14日收到。 1)瑞士红＋字会输血中心实验室 C（entralLaboratoryoftheBloodfransfusionServiceoftheSwissRed Cross)A.Hassig教授和R.Butter教授提供C3和 Bf标准品，谨此致谢。 3期 赵桐茂等：中国人补体第3成份 C（3）和备解素因子B(Bf）的遗传多态性 229 (19x19厘米）上的琼脂搪凝胶层中 使（用按1:1稀释的下述巴比妥缓冲液配制），使 用pH8.6，离子强度0.039的巴比妥缓冲液 （巴比妥钠40克，巴比妥6.9克，乳酸钙5H20 2.765克，溶解在5,000毫升蒸馏水中），以20伏／厘米的电压梯度电泳150分钟。然后用 4界乙酸溶液固定30分钟，用酞胺黑10B(AmidoBlack10B）染色15分钟，接着用2务 乙酸溶液洗涤直至背景清晰为止。根据着色带的数量和位置，对照标准血清的电泳结果， 判断受检血清的型别。C3表现型使用国际统一命名，如图1所示73〔0 弓 （ ︶ 已 侣 演 乙 ； 侣 嗯 江 洲 举 仅 契 图1 琼脂塘电泳中C3变异体的命名 Fig.1 NomenclatureofC3va